發(fā)布時(shí)間：2020-04-06 16:07

【摘要】： 雞傳染性支氣管炎(Infectious bronchitis，IB)是由傳染性支氣管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus，IBV)引起的一種急性高度接觸性傳染病，在世界范圍內(nèi)廣泛流行，造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。IBV變異速度快，血清型眾多，各血清型間缺乏交叉保護(hù)能力，防治困難。 1997年周繼勇等從以腺胃腫大為特征的病雞腺胃中分離到一株嗜腺胃IBV，命名為IBV-ZJ971。研究表明IBV-ZJ971 S1基因與IBVH120同源性很高，但組織嗜性迥然不同。為了在分子水平上探討IBV-ZJ971組織嗜性改變的機(jī)理，，并為新型疫苗的研制起鋪墊工作，我們克隆測(cè)序了IBV-ZJ971 S基因，并在大腸桿菌中表達(dá)了S基因。同時(shí)還克隆測(cè)序了標(biāo)準(zhǔn)株H52 S基因。 研究結(jié)果顯示，IBV-ZJ971具有以下分子特征：1)ZJ971第3241位堿基由G突變?yōu)門，形成一個(gè)終止密碼子，造成S基因翻譯提前終止，其S2蛋白比IBV-H52少82個(gè)氨基酸，2)ZJ971 S基因與呼吸型IBV-H52、M41、Beaudette、KB8523同源性很高，尤其是與IBV-H52同源性高達(dá)99.71％，但與Ark99、6／82、Cut2、B1648等毒株同源性較低(83.33-88.52％)。3)ZJ971 S基因第343、395、484、2555、2706、3241位核苷酸與H52及其它對(duì)照毒株不同，其中除2706位以外，其余都是有意義突變。4)對(duì)IBV-ZJ971、H52、M41、Beaudette、Ark99、6／82、Cut2、KB8523、B1648 S蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)分析顯示，ZJ971 S蛋白因多處氨基酸突變而不同于其它IBV，他們是：115位氨基酸由Tyr突變?yōu)镠is導(dǎo)致親水性增加；130位、132位突變?yōu)镻ro可能造成α螺旋不能形成；162位氨基酸由Asn突變?yōu)門yr；852位突變?yōu)镚ly導(dǎo)致S2蛋白親水性降低，使S1蛋白構(gòu)象因S2蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)的改變而改變。這些特征說明ZJ971病毒株因翻譯的提前終止以及核苷酸的點(diǎn)突變和氨基酸的改變，使其成為不同于其他IBV的新的傳染性支氣管炎變異株。 首次將IBV S基因插入原核表達(dá)質(zhì)粒并轉(zhuǎn)化大腸桿菌，使IBV的S蛋白得到了完整的表達(dá)，說明分子量較大的S基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)，這為進(jìn)一步開展IBV結(jié)構(gòu)蛋白及新型疫苗研究奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：Q785

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 郝春麗;雞傳染性支氣管炎病毒S1和NP基因的表達(dá)及NP-ELISA方法的建立[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2616730