【摘要】：目的 觀察尿酸（uric acid，UA）對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）NO-NOS通路及ADMA-DDAH系統(tǒng)的影響。方法 取3～6代HUVECs的單細(xì)胞懸液用于實(shí)驗(yàn)。1.濃度依賴性實(shí)驗(yàn)分四組：對(duì)照組、UA200μmol/L（UA2組），UA400μmol/L（UA4組），UA600μmol/L（UA6組）與HUVECs共同孵育24h 2.時(shí)間依賴性實(shí)驗(yàn)用UA600μmol/L與HUVECs共同孵育，分別觀察1、3、5、7天。收集培養(yǎng)液用以檢測(cè)一氧化氮（NO）活性以及超氧化物歧化酶（SOD）活性、非對(duì)稱二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine，ADMA）、血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ, Ang II）濃度，一氧化氮合酶（NOS），細(xì)胞裂解液用于測(cè)定二甲基精氨酸二甲氨水解酶（dimethylarginine dimethylaminohydrolase，DDAH）活性。ADMA采用高效液相色譜法分析（high performance liquid chromatography，HPLC），DDAH活性用L-胍氨酸濃度(L-citrulline，L-cit)表示。裂解液DDAH的表達(dá)用蛋白免疫印記分析(Western blotting)。結(jié)果 1、與對(duì)照組相比，三種濃度UA組NO明顯升高（15.70±2.29、44.00±5.39、55.56±7.35 vs 4.74±1.22μmol/L，P0.01）， NOS活性（3.79±0.49、4.58±0.67 vs 2.11±0.33U/L，P0.05）、DDAH活性（L-cit濃度 156.78±4.56、160.78±4.89 vs 102.56±2.32μmol/L,P0.05）活性則在UA4、UA6兩組才見明顯增加，而同時(shí)見ADMA濃度降低（0.62±0.042、0. 58±0.046 vs 0.93±0.048μmol/L，P0.05），AngII濃度、 DDAH則無顯著差異。另外SOD活性在UA4、UA6兩組升高(34.07±3.65、42.07±4.33 vs 22.85±2.71U/L ，，P0.05)，2、UA6組1、3、5、7天各時(shí)段NO濃度、NOS活性、DDAH活性均比對(duì)照組更高，而ADMA濃度降低，AngII濃度、DDAH表達(dá)無明顯差異。SOD活性亦增加。除NOS活性在第七天明顯下降，其余各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)在不同時(shí)段組沒有明顯的差異。結(jié)論 1、短期尿酸刺激使HUVECS分泌NO增多，且呈濃度依賴，而時(shí)間依賴不明顯。2、尿酸通過增加DDAH活性降解內(nèi)源性NOS競(jìng)爭(zhēng)抑制劑ADMA,使NOS活性增加而生成 NO增多。3、尿酸刺激不增加AngII濃度.4、尿酸使SOD活性增加
【學(xué)位授予單位】：江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R329.2

【引證文獻(xiàn)】

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2 戴新華;徐銳鋒;張春梅;全燦;方向;徐蓓;;血清中尿酸的測(cè)定方法及其研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代科學(xué)儀器;2006年04期

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本文編號(hào)：2616551