發(fā)布時間：2020-03-31 04:46

【摘要】：細胞免疫是機體抗腫瘤最主要的方式。細胞免疫主要由Th1細胞及其細胞因子負責。但是在腫瘤進行生長時間，腫瘤細胞直接或間接抑制特異T細胞功能，導致Th1細胞功能低下。因此，要獲得有效的抗腫瘤效應，活化Th1細胞是一個重要途徑。如何增強人體的Th1免疫細胞因子的產生，是腫瘤生物治療的關鍵。長期的實驗研究和臨床觀察發(fā)現(xiàn)磨損顆�？杉せ罹奘杉毎a生細胞因子，如IL-1、IL-6、TNF-α等，其磨損顆粒大小一般為0.5-300μm�，F(xiàn)行研究的免疫佐劑中，納米級佐劑-抗原復合物，都能很好的引起細胞免疫反應。如果，用無毒的、可降解的納米級顆粒刺激免疫細胞必將產生一些細胞因子，將對腫瘤細胞有一定的免疫治療作用。 目的 探討可降解與不可降解的納米級顆粒是否能刺激Balb/C小鼠脾細胞和人外周血單個核細胞增殖及是否促使其分泌IL-2及IFN-α。 材料與方法 實驗細胞用小牛血清濃度為10%的以IMDM培養(yǎng)液調成5×106/ml的Balb/c小鼠脾細胞懸液與用Ficoll分層離心法從年輕、健康女性的外周血分離的細胞濃度為1×106/ml的人單個核細胞懸液。 用不可降解的100nm、200nm左右的聚苯乙烯微球、10μm左右的二氧化硅顆粒、可降解的50nm左右殼聚糖或100nm左右的殼寡糖顆粒與Balb/c小鼠脾細胞或人外周血單個核細胞在37℃ 5% CO2飽和濕度條件下共同孵育24小時、48小時。24小時后用CTLL-2細胞株或細胞病變抑制法檢測上清溶液中的白細胞介素-2（IL-2）和α干擾素（IFN-α）及含量。48小時后用MTT法或3H～TdR摻入法檢測納米級顆粒對Balb/c小鼠脾細胞或人單個 WP=39 核細胞的促增值作用。 結果 200nm左右的聚苯乙烯微球濃度在40.625 ~325μg/ml時；100nm 左右的聚苯乙烯微球濃度在40.625 ~162.5μg時對Balb/c小鼠脾細胞及人單個核細胞有促增殖作用(P ＜0.05），并濃度各在162.5μg/ml、 81.25μg/ml時促增殖作用最明顯(P ＜0.01）。并產生IL-2及IFN-α，與促細胞增殖程度相符；可降解的50nm左右的殼聚糖在1.25~40μg/ml時；100nm左右的的殼寡糖顆粒在1.25~20μg/ml時對Balb/c小鼠脾細胞及人單個核細胞有促增殖作用(P ＜0.05），濃度均在2.5μg/m時促增殖作用最明顯 (P ＜0.01)，并產生IL-2及IFN-α，其含量與促細胞增殖程度相符。10μm左右的二氧化硅顆粒在任何濃度下對小鼠脾細胞無增值作用。 結論 納米級顆粒對Balb/c小鼠脾細胞及人外周血單個核細胞促增殖作用；納米級顆粒刺激人外周血單個核細胞，促使其分泌細胞因子IL-2及IFN-α；納米級顆�？梢源碳っ庖呒毎�，引起Th1細胞免疫，這將在抗腫瘤的治療中發(fā)揮關鍵的作用。
【圖文】：

攪拌速度200～300 r/min. 在75 ℃的水浴中,反應24h后,得到穩(wěn)定的表面富集季胺鹽的交聯(lián)聚苯乙烯微球的乳液. 利用離心,再分散和滲析等方法純化聚苯乙烯微球。表征為如圖1TEM圖象所示直徑各為200nm左右、100nm左右，且聚苯乙烯顆粒呈較均勻的球形且表面光滑.并已單分子的形式均勻的分散在溶液中[18]。先用D-Hank，s液配成50mg/ml，高溫、高壓消毒， 4℃保存，用前稀釋。由吉林大學超分子結構與材料教育部重點實驗室提供2、二氧化硅顆粒：不可降解的二氧化硅顆粒直徑在 10μm 左右，，先用D-Hank，s 液配成 10mg/ml，高溫、高壓消毒， 4℃保存，用前稀釋。吉林大學超分子結構與材料教育部重點實驗室提供

吉林大學碩士學位論文 納米顆粒免疫刺激作用的初步研究3、殼聚糖顆粒 ：殼聚糖是由N-乙酰氨基葡萄糖聚合而成的多糖-甲殼質經脫乙�；幚砗蟮玫�。如圖2所示其直徑在50nm左右，表面光滑，呈球形，先用D-Hank，s液配成25.6mg/ml，高溫、高壓消毒， 4℃保存，用前稀釋。殼聚糖具有多種生物活性，具有生物相容性好，可被體內多種酶類降解，降解產物完全無毒，并能被生物體完全吸收，有很強的免疫調節(jié)及抗腫瘤作用[18、19]。濟南海得貝海洋生物有限公司提供。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R392

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本文編號：2608585