【摘要】： 為了解乙型肝炎病毒（HBV）D基因型在中國(guó)的存在狀況及全基因序列特征， 應(yīng)用在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增HBV前S基因基礎(chǔ)之上的限制性片段長(zhǎng)度 多態(tài)性（RFLP）的方法調(diào)查了中國(guó)部分地區(qū)HBV基因型分布。認(rèn)為D基因型毒株 在中國(guó)部分地區(qū)并非少見。全基因PCR和克隆后測(cè)定并分析了一例HBV D基因型 毒株的全基因，GeneBank Accession Number為AF280817。GeneBank中全部30株 野生型HBV D基因型毒株的種系進(jìn)化樹提示：本文報(bào)告的唯一一株中國(guó)D型 AF280817株與瑞典的四株D型進(jìn)化距離最近；亞洲呈非HBV D基因型分布的優(yōu) 勢(shì)地域；認(rèn)為病毒傳入來源、遷移的不同及病毒在具有不同遺傳和免疫特質(zhì)的宿主 中的長(zhǎng)期選擇可能是形成HBV同一基因型病毒株進(jìn)化距離不同的原因。 本文應(yīng)用DNASIS和CLUSTALW分析軟件將已發(fā)表的223株HBV全序列進(jìn) 行基因型分型、S基因核苷酸及氨基酸序列對(duì)齊比較，分析每一種基因型特有的核 苷酸或氨基酸序列后發(fā)現(xiàn)了每一種基因型特異性的限制性內(nèi)切酶，建立了S基因 PCR-RFLP的基因型分型方法學(xué)，，可鑒別A-F基因型。部分不同基因型標(biāo)本經(jīng)S基 因序列測(cè)定證實(shí)了此方法的準(zhǔn)確性。該方法克服了既往方法學(xué)參考序列少，代表性 略差，圖譜復(fù)雜等缺點(diǎn)，更具簡(jiǎn)明、靈敏和特異性，益于HBV基因型的流行病學(xué) 調(diào)查及基因型在HBV感染疾病進(jìn)程中潛影響的研究。用此方法初步探討HBV基 因型與HBV疾病譜相關(guān)性，對(duì)廣東地區(qū)HBV感染者200例，其中無癥狀攜帶者 （AsC）組80例和肝硬化（LC）組120例血清標(biāo)本分型。結(jié)果表明廣東地區(qū)未發(fā) 現(xiàn)A、E和F基因型，以B和C型為優(yōu)勢(shì)基因型，AsC組中以B型為主要基因型 （37/80），同一疾病譜中基因型分布均與e抗原狀態(tài)無顯著性差異（P＞0.05）；不同 疾病譜的兩組基因型分布有顯著性差異（P＜0.01）；C型在ASC→LC中呈現(xiàn)增多趨 勢(shì)，而B和D型在ASC→LC中呈現(xiàn)減少趨勢(shì)，ASC與LC組相比X~2=31.924 P=0.000， 可預(yù)示：可能感染HBV D基因型病情輕，感染HBV C基因型病情易加重。
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：R373.21

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