【摘要】： 血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)的增殖肥大是高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等多種血管增殖性疾病共同的細(xì)胞病理基礎(chǔ)之一,研究表明在介導(dǎo)VSMC增殖肥大中起主要作用的是G蛋白偶聯(lián)受體通路、酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase,TPK)通路、整合素介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路。此外,還存在著許多已知和未知的信號(hào)通路,它們?cè)诙鄠�(gè)層次上發(fā)生交互調(diào)節(jié),構(gòu)成復(fù)雜的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò),共同決定細(xì)胞的生物學(xué)行為。 已知ERK通路和TGF-? /Smad通路在許多細(xì)胞中可發(fā)生對(duì)話,共同協(xié)調(diào)細(xì)胞的一些生物學(xué)行為,并且這兩條通路都可促進(jìn)VSMC的增殖。但在VSMC內(nèi),這兩條通路是否存在交互調(diào)節(jié)及其它們之間發(fā)生交互調(diào)節(jié)的具體環(huán)節(jié)及分子機(jī)制目前還不清楚。 本實(shí)驗(yàn)在原代培養(yǎng)人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(human umbilical artery smooth muscle cells,hUASMC)的基礎(chǔ)上,取3-15代hUASMC用于實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)分四組:對(duì)照組,血小板源性生長(zhǎng)因子(platelet derived growth factor,PDGF)組,ERK阻斷劑(PD98059)組和PDGF+ERK阻斷劑組。繼續(xù)培養(yǎng)24h后,用MTT法測(cè)細(xì)胞的增殖活性,用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)測(cè)細(xì)胞內(nèi)核增殖抗原(proliferation of cell nucleus antigen,PCNA)、磷酸化ERK、磷酸化Smad2/3蛋白的表達(dá);用RT-PCR法測(cè)細(xì)胞內(nèi)Smad2/3 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果:(1)與對(duì)照組相比,PDGF組hUASMC內(nèi)PCNA的表達(dá)明顯增強(qiáng),MTT法測(cè)得A值也升高(P0.01),ERK阻斷劑組和PDGF+ERK阻斷劑組hUASMC內(nèi)PCNA的表達(dá)和MTT法測(cè)得的A值比PDGF組明顯減少,與對(duì)照組無(wú)差異;(2)與對(duì)照組相比,PDGF組hUASMC內(nèi)磷酸化ERK的表達(dá)明顯增強(qiáng)(P0.01),ERK阻斷劑組和PDGF+ERK阻斷劑組hUASMC內(nèi)磷酸化ERK的表達(dá)比PDGF組明顯減少,與對(duì)照組無(wú)差異;(3)與對(duì)照組相比,PDGF組hUASMC內(nèi)磷酸化Smad2/3的表達(dá)明顯增強(qiáng)(P0.01),ERK阻斷劑組和PDGF+ERK阻斷劑組hUASMC內(nèi)磷酸化Smad2/3的表達(dá)比PDGF組明顯減少,與對(duì)照組無(wú)差異;(4)各組間hUASMC內(nèi)Smad2/3 mRNA的表達(dá)無(wú)差異。 結(jié)論:(1)PDGF可誘導(dǎo)hUASMC增殖,在此過(guò)程中ERK通路發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用;(2)在hUASMC內(nèi),Smad蛋白是ERK的下游信號(hào)分子之一,ERK通路激活后可引起Smad蛋白磷酸化,并介導(dǎo)了hUASMC的增殖;(3)在hUASMC內(nèi),ERK通路對(duì)
【圖文】：

16Fig 5 Expression of phosphorylated ERK protein in hUSMC from different groups (SP method,×200,except F)A.Control group;B:PDGF group;C.ERK blocking agent group;D.PDGF+ERK blocking agent group;E.Negative control(The primary antibody was substitued with goat serum);F.Positive expression ofphosphorylated ERK protein in hUSMC(SP method,×400)圖 5 各組 hUSMC 內(nèi)磷酸化 ERK 蛋白的表達(dá)

各組hUSMC內(nèi)PCNA的表達(dá)EF
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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1 晉軍,祝善俊,祝之明,楊永健,丁鋼;自發(fā)性高血壓大鼠中血小板源生長(zhǎng)因子-AA及其受體表達(dá)與血管平滑肌細(xì)胞增殖的關(guān)系[J];生理學(xué)報(bào);2002年02期

2 李朝紅,鄧漪平;G蛋白在調(diào)節(jié)血管平滑肌細(xì)胞功能活動(dòng)中的作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));1997年02期

3 任雨笙,杜榮增,崔芳,潘曉明,顧興建,吳宗貴;血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞增殖的影響[J];高血壓雜志;2003年03期

4 高連如,John Teerlink,Joel Karliner;慢性心力衰竭大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β—Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)異常[J];中華心血管病雜志;2001年03期

5 許頂立,劉煜,汪明慧,歐陽(yáng)平,賴文巖;血管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制因子的調(diào)節(jié)[J];中華心血管病雜志;2003年04期

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本文編號(hào)：2576629