【摘要】：內(nèi)向整流鉀通道(Kir)在控制膜興奮性中起到很重要的作用,抑制Kir 可使細(xì)胞膜產(chǎn)生去極化進(jìn)而提高膜的興奮性。Kir2.3 作為其中的一員,表達(dá)在多種組織,例如中樞神經(jīng)系統(tǒng),心臟和腎臟�，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)Kir2.3 的功能可受多種細(xì)胞內(nèi)外分子的調(diào)節(jié),如Mg~(2+),多胺,質(zhì)子,蛋白激酶C(PKC)等。因?yàn)楹芏嗉?xì)胞外信號(hào)分子都是通過激活PKC 作用于鉀通道,所以了解PKC對(duì)于鉀通道的調(diào)節(jié)作用機(jī)制很重要。已知PKC是一超家族,存在有很多亞型,但對(duì)PKC 亞型在Kir 通道調(diào)節(jié)中所起的作用所知甚少。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖橇私猞�、β和ε等PKC 亞型在調(diào)節(jié)Kir2.3 通道中的作用。本實(shí)驗(yàn)以非洲爪蟾卵母細(xì)胞為表達(dá)系統(tǒng),用雙電極電壓鉗記錄表達(dá)于爪蟾卵母細(xì)胞的全細(xì)胞Kir2.3 電流,采用特異的蛋白激酶亞型抑制劑--多肽,研究α、β和ε亞型的PKC 在調(diào)節(jié)Kir2.3 通道中作用。我們發(fā)現(xiàn)εPKC 短肽抑制劑可部分阻斷PMA 對(duì)Kir2.3的抑制,而α和βPKC 短肽抑制劑卻不能阻斷該抑制作用。 第一部分:在非洲爪蟾卵母細(xì)胞中表達(dá)Kir2.3 通道 目的:在非洲爪蟾卵母細(xì)胞中表達(dá)內(nèi)向整流鉀離子通道。研究內(nèi)向整流性鉀離子通道的電生理特性。 方法:(1) cRNA 的體外轉(zhuǎn)錄:Kir2.3 通道克隆到質(zhì)粒載體pGEMHE 中,其序列經(jīng)測序驗(yàn)證。用適當(dāng)?shù)南拗菩詢?nèi)切酶將質(zhì)粒線性化后,用Ribomax~(TM) Large Scale RNA Production Systems-SP6 and T7 Kit 體外轉(zhuǎn)錄得Kir2.3 的
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R33

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2574529