【摘要】： 氧是生命活動(dòng)的基本物質(zhì)之一，機(jī)體氧利用問(wèn)題是關(guān)乎生命健康與否的重要科學(xué)命題。腦紅蛋白(NGB)和胞紅蛋白(CGB)為新近發(fā)現(xiàn)的兩種攜氧珠蛋白，其中腦紅蛋白特異分布于神經(jīng)組織，而胞紅蛋白廣泛分布于幾乎所有組織。二者的發(fā)現(xiàn)使人們認(rèn)識(shí)到機(jī)體氧利用的復(fù)雜性�；谀X紅蛋白和胞紅蛋白與攜氧珠蛋白其他成員如血紅蛋白、肌紅蛋白相似的血紅素結(jié)合特征以及可逆結(jié)合氧的動(dòng)力學(xué)特征，人們認(rèn)為腦紅蛋白和胞紅蛋白可能有助于機(jī)體減輕氧化損傷，并提出相應(yīng)的功能假說(shuō)，但是目前仍無(wú)確鑿的證據(jù)支持這些假說(shuō)�？紤]到蛋白質(zhì)功能往往可能是通過(guò)與其他蛋白相互作用形成分子網(wǎng)絡(luò)來(lái)發(fā)揮，本課題以新發(fā)現(xiàn)的分別與腦紅蛋白、胞紅蛋白的相互作用蛋白為切入點(diǎn)，深入探討新發(fā)現(xiàn)攜氧珠蛋白的缺氧保護(hù)功能機(jī)制。 課題分兩部分進(jìn)行。在第一部分中集中于酵母雙雜交篩選到的與腦紅蛋白相互作用蛋白—谷氨酰脯氨酰tRNA合成酶(EPRS)開(kāi)展相關(guān)研究，首先采用一系列生物化學(xué)技術(shù)證明NGB與EPRS之間存在相互作用，并基于EPRS的結(jié)構(gòu)和功能，篩選并驗(yàn)證缺氧敏感性的氨基酰tRNA合成酶成員(ARSs)，發(fā)現(xiàn)組氨酰tRNA合成酶、異亮氨酰tRNA合成酶、谷氨酰胺tRNA合成酶以及輔酶因子P43均對(duì)CoCl_2模擬的缺氧刺激表現(xiàn)出一定的敏感性，，為理解ARS在神經(jīng)系統(tǒng)缺氧損傷中的作用奠定基礎(chǔ)以及為明晰NGB抗缺氧的分子機(jī)制提供了一定線索。 在第二部分中基于實(shí)驗(yàn)室前期采用酵母雙雜交篩選到的與CGB相互作用的金屬硫蛋白Ⅱ(MT2)開(kāi)展相關(guān)研究。繼前期酵母回轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞熒光共定位實(shí)驗(yàn)之后，首先采用免疫共沉淀技術(shù)驗(yàn)證CGB與MT2在生理水平存在相互作用，然后基于MT2清除重金屬毒性以及自由基的功能，通過(guò)一系列PC12細(xì)胞氧化損傷模型證實(shí)CGB與MT2具有提高細(xì)胞抗氧化損傷能力，提出CGB可能通過(guò)MT2增加清除體內(nèi)過(guò)剩自由基的能力，實(shí)現(xiàn)廣泛的抗氧化損傷功能，為進(jìn)一步探討CGB的抗缺氧損傷分子機(jī)制提供線索。 綜上所述，本研究揭示了腦紅蛋白和胞紅蛋白實(shí)現(xiàn)缺氧保護(hù)功能的部分機(jī)制，為臨床實(shí)踐中研發(fā)治療缺氧相關(guān)的疾病藥物提供了重要參考價(jià)值。
【圖文】：

.真核生物中MSC結(jié)構(gòu)示意圖究發(fā)現(xiàn)此重復(fù)序列的刪除對(duì)蛋白質(zhì)合成并沒(méi)有很大的影響，蛋白合成活性所必需的。但是在人和鼠源EPRS中此序列由57個(gè)氨基酸構(gòu)成;在果蠅中重復(fù)六次，每一拷貝由75個(gè)現(xiàn)此重復(fù)序列不是EPRS所獨(dú)有的，在很多ARS的N端或單一拷貝(圖2)以及在線蟲(chóng)GluRS中也發(fā)現(xiàn)由57個(gè)氨基W日E尸一下RS重復(fù)序列。對(duì)于WHEP一TRS序列在ARS中的人們所知甚少，推測(cè)其可能在細(xì)胞中扮演了催化功能以外中的WHE戶一丁RS結(jié)構(gòu)域被發(fā)現(xiàn)是肌炎癥患者自身抗體的一rPRS中該片段可抑制血管生成;GlyRS中此段突變可導(dǎo)致遺該片段可提高核糖體RNA的合成效率，并且有助于氨酞化a的轉(zhuǎn)移(SamPathetal.，2004)等。

bufferlX一gal溶液中(，一3mm直徑大小上)，室溫解凍。(菌落面朝上)，藍(lán)色，shr內(nèi)有效。種植入四缺SDI-T細(xì)胞，提取質(zhì)粒。S。(圖1.3)
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：R363

【共引文獻(xiàn)】

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1 李玲玲;劉蓉;葉蘭;徐運(yùn);;抗氧化劑在阿爾茨海默病治療中的地位和臨床應(yīng)用前景[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2009年06期

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2 聶鴻靖;急性低氧對(duì)紅細(xì)胞的損傷及低氧習(xí)服的保護(hù)作用[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

3 楊正行;莫匹羅星的菌種選育與發(fā)酵工藝的研究[D];上海師范大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2573464