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利用噬菌體肽庫技術(shù)篩選SARS冠狀病毒N蛋白B細胞表位的研究

發(fā)布時間:2020-01-22 21:22
【摘要】:研究背景與目的:SARS的流行給人民的身體健康和社會經(jīng)濟發(fā)展帶來了巨大的威脅。目前對SARS尚無特效的治療措施,80%的患者在前兩個階段,即病毒復制期和超敏反應期,,經(jīng)過及時有效的器械輔助及藥物治療后可出現(xiàn)好轉(zhuǎn),并最終治愈。由于該病是新近發(fā)生的傳染病,造成的危害已遠遠超出了疾病本身的范疇,有關(guān)的發(fā)病機制、診斷及防治等方面的深入研究均是急需解決的問題。 核衣殼(N)蛋白是SARS冠狀病毒(SARS-CoV)重要的結(jié)構(gòu)蛋白,位于SARS—CoV的核心,由422個氨基酸組成,分子量約46kDa。N蛋白在宿主細胞質(zhì)中合成后迅速磷酸化,并和包膜蛋白的羧基末端與病毒基因組RNA結(jié)合形成核衣殼。綜合目前對N蛋白的研究成果,可知N蛋白廣泛分布在SARS病人的多個器官和組織,其基因組序列基本保守,具有良好的抗原性。研究表明針對N蛋白的抗體產(chǎn)生早,引起的免疫反應強烈而持久,所以N蛋白不僅是SARS疫苗的候選分子,而且是良好的可應用于病毒感染早期診斷的靶抗原。 本實驗室曾用滅活的SARS全病毒免疫小鼠,并通過一系列的篩選和配對試驗,得到88株親和力高、特異性強的抗SARS-CoV N蛋白的單克隆抗體。本研究擬選擇這些單克隆抗體與N蛋白進行ELISA配對試驗,鑒定出針對N蛋白不同表位的單克隆抗體,然后利用這些單抗采取ELISA夾心法親和篩選噬菌體隨機十二肽庫,最后通過測序分析得到N蛋白的不同表位,然后繪制表位圖。為SARS的早期診斷及SARS基因工程疫苗的研制奠定基礎。
【圖文】:

顆粒模,病毒復制,冠狀病毒,宿主細胞


冠狀病毒顆粒模式圖

SARS病毒,電鏡,病毒基因


圖2:電鏡卜的SARS病毒F192:SARS一CoVnieleetronPhotomciroseoPeSARS一CovN蛋白的生物學特性白是SARS冠狀病毒重要的結(jié)構(gòu)蛋白,位于SARS一CoV的核心中合成后迅速發(fā)生磷酸化,并和M蛋白的梭基末端與病毒基因核衣殼。N蛋白具有3個結(jié)構(gòu)域,其中央?yún)^(qū)與基因組RNA結(jié)合,
【學位授予單位】:第一軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R392

【參考文獻】

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本文編號:2572076

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