【摘要】：毛癬菌屬是皮膚癬菌病最常見的致病菌，其中又以紅色毛癬菌和須癬毛癬菌最為多見。二者不僅能引起體股癬、手足癬、甲癬、頭癬等癬病，還能引起膿癬、膿腫和肉芽腫等深部感染。癬病極為頑固，常出現(xiàn)復(fù)發(fā)和再感染，現(xiàn)有藥物難以達(dá)到根治的效果。 目的和意義： 本研究針對(duì)皮膚癬菌菌落的色澤、形態(tài)學(xué)易變異和細(xì)胞生理和生化學(xué)特征，通過(guò)對(duì)菌株株系及傳代過(guò)程的表型鑒定，確定傳代在表型變異中影響，以及這種變異是否具有可逆性。對(duì)已變異表型的菌株進(jìn)而從基因水平上進(jìn)行探討，從而比較在保存和傳代過(guò)程中該菌表型與基因型的穩(wěn)定性關(guān)系。同時(shí)，本研究還利用分辨率較高的tDNA-RFLP與Southern印記雜交技術(shù)和PCR擴(kuò)增核糖體基因?qū)煞N最常見的毛癬菌即紅色毛癬菌和須癬毛癬菌進(jìn)行基因分型，探討二者基因型與表型、發(fā)病部位和不同地區(qū)來(lái)源菌株等臨床特征的相關(guān)性，以備臨床各項(xiàng)研究的需要。 方法與結(jié)果： 將207株紅色毛癬菌菌株于室溫下保存1年，10株近期獲得的紅色毛癬菌臨床分離株及1株紅色毛癬菌標(biāo)準(zhǔn)菌株，間隔2-4周傳代3-20次后，根據(jù)菌落的形態(tài)和色素特征分別對(duì)保存前后、傳代前后的菌株進(jìn)行表型分型。結(jié)果表明保存1年后，其中54株菌株發(fā)生了形態(tài)變異；11株紅色毛癬菌傳代過(guò)程中的菌落形態(tài)及色素特征發(fā)生多次變異。因此，證明在保存和傳代過(guò)程中，紅色毛癬菌的表型極不穩(wěn)定。 采用RAPD及tDNA RFLP-Southern Blotting的方法對(duì)上述10株紅色毛癬菌臨床分離株、1株標(biāo)準(zhǔn)株的原代及傳至3-4代后進(jìn)行基因型的分析，，結(jié)果表明原代與傳代后的擴(kuò)增及雜交帶型一致，提示紅色毛癬菌傳代過(guò)程中基因型穩(wěn)定。應(yīng)用兩對(duì)特異性引物擴(kuò)增其中6株菌株原代及第20代的核糖體保守區(qū)(部分5.8s和ITS-2)、TRS1區(qū)和TRS2區(qū)基因，結(jié)果表明同一菌株的原代與20代PCR指紋圖一致，基因序列基本一致。進(jìn)一步證實(shí)了傳代過(guò)程中菌株的核糖體基因是穩(wěn)定的。 對(duì)6株紅色毛癬菌原代及其相應(yīng)第20代的核糖體保守區(qū)(部分5.8s和ITS-2)基因序列測(cè)定結(jié)果，表明6株紅色毛癬菌原代及其相應(yīng)第20代片段大小均約為320bp，與基因庫(kù)紅色毛癬菌標(biāo)準(zhǔn)株ATCC28188基因序列比，其同源性達(dá)99％。實(shí)驗(yàn)菌株的TRS-1區(qū)重復(fù)單位基因序列基本相同，但13號(hào)菌的TRS-1區(qū)第一個(gè)重復(fù)單位和23號(hào)菌第二個(gè)重復(fù)單位的第198—200位堿基TCG由CAT取代，15號(hào)菌TRS-1區(qū)第二個(gè)重復(fù)單位中第194位堿基C
【圖文】：

—8(40.0%)12(60.0%)40.0%3.2.2傳代后菌落形態(tài)及色素變異情況(1)11株紅色毛癬菌在傳至3/4代時(shí)，菌落形態(tài)和色素變異情況(見圖3.1和表3.2)。表3.2n株紅色毛癬菌傳代后菌落形態(tài)和色素變異情況VariatioSnnicolonymoprholo盯nadPi腳entduringsubculLt甘eof11T.川bUnrIsrtajns1代2代3代4代5代菌株12l3161822ATCC形態(tài)溝紋羊毛羊毛溝紋溝紋粉末溝紋絨毛粉末羊毛絨毛色素酒紅黃黃暗紅黃酒紅黃黃黃黃暗紅形態(tài)溝紋羊毛羊毛溝紋溝紋絨毛溝紋絨毛絨毛羊毛絨毛色素黃黃黃暗紅暗紅黃黃黃黃黃黃形態(tài)溝紋絨毛羊毛羊毛溝紋絨毛溝紋羊毛絨毛羊毛絨毛色素暗紅黃黃酒紅暗紅黃黃黃黃黃黃形態(tài)溝紋絨毛羊毛羊毛溝紋絨毛溝紋羊毛絨毛羊毛絨毛色素暗紅黃黃酒紅黃黃紅黃黃黃酒紅黃形態(tài)溝紋絨毛色素暗紅黃41勺‘.幾..上溝紋絨毛溝紋黃黃酒紅絨毛羊毛絨毛酒紅酒紅黃O口八U‘.1，人O白Q自

圖3.25株紅色毛癬菌傳20代后菌落形態(tài)和色素變異情況
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R379

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2569971