【摘要】： 膽固醇攝入過量帶來的高脂血癥、冠心病、動(dòng)脈硬化等心血管疾病已經(jīng)嚴(yán)重危害到人體健康,如何減少膽固醇攝入量、降低人體血清膽固醇水平的研究越來越受到廣泛關(guān)注。國外已有大量關(guān)于乳酸菌降膽固醇作用的文獻(xiàn)報(bào)道,但具體的篩選指標(biāo)、去除機(jī)理等尚不明確,本研究旨在分離出來源于健康人體腸道的乳桿菌菌株,通過耐膽鹽能力、生長能力、體外降膽固醇量、去結(jié)合膽鹽能力等一系列指標(biāo)評(píng)價(jià)乳桿菌菌株的降膽固醇綜合性能,篩選出具有很好的降膽固醇性能的潛力菌株用于益生菌制劑的開發(fā)應(yīng)用,同時(shí)通過引入膽酸-膽固醇共沉淀曲線、有無添加膽汁鹽時(shí)菌株體外去除膽固醇量比較等方法探討乳桿菌降膽固醇作用的機(jī)理,為優(yōu)良菌株的篩選提供理論指導(dǎo)。 首先通過選擇性培養(yǎng)基平板涂布法篩選得到若干乳桿菌,經(jīng)革蘭氏染色選出陽性且形態(tài)特征符合乳桿菌的菌株。用乳桿菌特異引物將分離得到的細(xì)菌總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到500bp左右乳桿菌特異片段,將產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,通過序列比對(duì)鑒定到種,用于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。 對(duì)6個(gè)種共14株乳桿菌的膽鹽耐受性評(píng)價(jià)表明,有11株對(duì)2.8mM甘膽酸鈉和1.2mM�；悄懰徕c混合膽汁鹽耐受性很好,遲滯期小于2.00h,4株在6mM牛磺膽酸鈉膽汁鹽中遲滯期小于2.00h,且?guī)缀鯉缀跛芯陮?duì)甘膽酸鈉的耐受性比都對(duì)�；悄懰徕c更強(qiáng)。 菌株體外降膽固醇能力研究發(fā)現(xiàn),有7株菌在添加2.8mM甘膽酸鈉和1.2mM�；悄懰徕c混合膽汁鹽的培養(yǎng)基中對(duì)膽固醇的去除量在20.00μg/ml以上,其中6株在6mM�；悄懰徕c中的去除量也高于20.00μg/ml。且研究表明,降膽固醇能力具有明顯的菌株間差異。 菌株去結(jié)合膽鹽能力評(píng)價(jià)結(jié)果發(fā)現(xiàn),去結(jié)合膽鹽能力同樣有明顯的菌株間差異。其中有4株的產(chǎn)膽酸量較高,在3.50-5.00μmol/ml之間。綜合三個(gè)篩選指
【圖文】：

圖 1.5 BSH 酶水解結(jié)合膽鹽示意圖Figure1.5 Hydrolyzation of conjugated bile salt by BSH存在對(duì)乳酸菌自身及其宿主有很多影響[44]，包括：膽鹽毒性

圖 3.1 Lp529 和 Lp501 的革蘭氏染色圖片F(xiàn)igure 3.1 The Gram-coloration pictures of Lp529 and Lp501用乳桿菌屬 16S rDNA 特異引物針對(duì)這些菌株的 DNA 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，得到約 500bp 的乳桿菌 PCR 片段，，產(chǎn)物經(jīng) 1％瓊脂糖凝膠電泳，用凝膠圖像分析系
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R371

【引證文獻(xiàn)】

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1 路四海;趙瑞香;牛生洋;袁崢;;乳酸菌降低膽固醇作用及其機(jī)理的研究進(jìn)展[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2012年02期

2 路四海;趙瑞香;祁婷婷;;兩株嗜酸乳桿菌體外降低膽固醇的研究[J];食品與機(jī)械;2011年06期

3 陳帥;劉娟;王蔭榆;吳正鈞;劉振民;;植物乳桿菌ST-Ⅲ菌株降膽固醇影響因素的研究[J];食品工業(yè)科技;2010年08期

4 楊琴;胡穎;甘盛力;朱秋勁;何臘平;胡萍;朱建榮;;降膽固醇乳酸菌的篩選及對(duì)大鼠血脂的影響[J];食品科學(xué);2011年21期

5 李婷婷;張洋;林超;霍貴成;;降膽固醇優(yōu)良菌株的篩選及其膽鹽水解酶特性研究[J];食品工業(yè)科技;2012年24期

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2 姜金康;乳桿菌屬膽汁鹽水解酶的活性多樣性、底物特異性及相關(guān)基因研究[D];上海交通大學(xué);2008年

3 王歡;植物乳桿菌降膽固醇作用的研究[D];黑龍江大學(xué);2010年

4 徐晶雪;降膽固醇益生菌的研究[D];黑龍江大學(xué);2010年

5 趙超;產(chǎn)膽甾-4-烯-3-酮菌株的篩選、鑒定及其發(fā)酵優(yōu)化[D];四川師范大學(xué);2010年

6 章秀梅;降膽固醇乳酸菌的篩選鑒定及其高密度培養(yǎng)研究[D];廣西工學(xué)院;2012年

7 路四海;嗜酸乳桿菌降低膽固醇作用及其機(jī)理研究[D];河南科技學(xué)院;2012年

本文編號(hào)：2563909