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相互作用分析的毛細(xì)管電泳方法研究與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2019-11-13 10:38
【摘要】: 相互作用在化學(xué)體系、生物化學(xué)體系和環(huán)境體系中廣泛存在,是各種生理活動(dòng)得以正常進(jìn)行和生理功能得以正常發(fā)揮的基礎(chǔ)。毛細(xì)管電泳具有分離效率高、分析速度快、樣品用量少等特點(diǎn),在研究分子相互作用方面具有獨(dú)到的優(yōu)勢(shì)。因此開(kāi)展相互作用研究,特別是毛細(xì)管電泳相互作用分析及應(yīng)用研究在手性藥理學(xué)、環(huán)境毒理學(xué)、藥物創(chuàng)制學(xué)及生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域有重要意義。 相互作用有多種表達(dá)方式,包括結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)及自由能變等參數(shù),其中結(jié)合常數(shù)是表征相互作用強(qiáng)弱最重要的參數(shù)之一。 本文在以毛細(xì)管電泳為手段研究分子相互作用的基礎(chǔ)上,發(fā)展了分子相互作用的毛細(xì)管電泳分析(CEIA)方法,特別是針對(duì)復(fù)雜體系和電中性分子的相互作用分析方法。將CEIA方法應(yīng)用于小分子與生物大分子、小分子與細(xì)菌和雞血紅細(xì)胞的相互作用分析,以獲得相互作用結(jié)合常數(shù)。論文進(jìn)一步基于相互作用的原理,開(kāi)展了以可溶性淀粉、糊精和麥芽糖為手性添加劑的西酞普蘭毛細(xì)管電泳手性分離,并對(duì)手性識(shí)別相互作用機(jī)理進(jìn)行了較為深入的研究。具體主要內(nèi)容包括: (1)應(yīng)用毛細(xì)管電泳方法,使用十二烷基硫酸鈉膠束賦予中性客體分子對(duì)-硝基苯胺和2-氨基吡啶有效淌度,研究了中性主體分子18-冠醚-6與對(duì)-硝基苯胺和2-氨基吡啶的相互作用,建立了中性分子相互作用的毛細(xì)管電泳分析方法。以毛細(xì)管電泳峰漂移方法,測(cè)得了中性主體與中性客體分子之間的相互作用結(jié)合常數(shù)。 (2)將毛細(xì)管電泳相互作用分析方法從一種物質(zhì)與另一種物質(zhì)的相互作用的測(cè)定發(fā)展到多個(gè)組分共存時(shí)與另一物質(zhì)的相互作用測(cè)定,達(dá)到了同時(shí)評(píng)價(jià)各組分與指定分子的結(jié)合能力的目的。通過(guò)這種方法測(cè)定了大黃中的有效成分大黃素、蘆薈大黃素和大黃酚與β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精的結(jié)合常數(shù)。 (3)應(yīng)用毛細(xì)管電泳區(qū)帶灌注-自標(biāo)記技術(shù),研究了麻黃堿、咖啡因、對(duì)乙酰氨基酚與牛血清白蛋白的相互作用以及麻黃堿與雞血紅細(xì)胞的相互作用。 (4)通過(guò)對(duì)細(xì)菌樣品預(yù)處理方法、緩沖液種類、檢測(cè)波長(zhǎng)以及聚合物添加劑對(duì)分離度影響等的考察,研究了大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的毛細(xì)管電泳行為,獲得了優(yōu)化的毛細(xì)管電泳分離條件,實(shí)現(xiàn)了大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的快速分離,從而建立起一種輔助的細(xì)菌定性識(shí)別方法。進(jìn)一步,研究了抗菌藥物阿奇霉素與金黃色葡萄球菌的相互作用,發(fā)現(xiàn)阿奇霉素能與金黃色葡萄球菌的表面蛋白發(fā)生相互作用,從而引起金黃色葡萄球菌淌度的變化。 (5)基于競(jìng)爭(zhēng)相互作用原理,采用非手性的C18色譜柱,通過(guò)在流動(dòng)相中加入手性選擇劑β-環(huán)糊精的方法實(shí)現(xiàn)了西布曲明對(duì)映體的拆分。西布曲明對(duì)映體在
【學(xué)位授予單位】:重慶大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R313

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2560265

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