【摘要】： 第一部分不同年齡大鼠腦組織中MHC、CD4及CD8分子的表達(dá)及其意義 目的:觀察不同年齡大鼠腦組織中MHCI、MHCII、CD4及CD8分子的表達(dá),并探討其意義。方法:將實(shí)驗(yàn)大鼠按胎齡和日齡分為7組:E15d、E19d、P0d、P7d、P14d、P28d及老年組(24月齡),每組6只,共42只大鼠。經(jīng)灌流取材冰凍切片,選取頂葉大腦皮質(zhì)、海馬、黑質(zhì)、紋狀體、小腦及脈絡(luò)叢等部位,采用免疫組化染色方法,檢測MHCI、MHCII、CD4和CD8分子在上述部位的表達(dá)情況。 結(jié)果:(1)E15d大鼠腦組織未見MHCI類分子的表達(dá);其他年齡組在結(jié)締組織和脈絡(luò)叢有MHCI類分子的表達(dá)。其中從P0～P14d組海馬和頂葉大腦皮質(zhì)神經(jīng)元上MHCI類分子的表達(dá)隨著日齡的增加而逐漸升高,P14d組的表達(dá)最高(P0.05);P28d組的表達(dá)明顯下降(P0.05);老年組大鼠海馬神經(jīng)元上的表達(dá)再次升高(P0.05)。(2)E15d組大鼠腦組織中未見MHCII、CD4和CD8分子的表達(dá);其他年齡組MHCII、CD4和CD8除在結(jié)締組織和脈絡(luò)叢表達(dá)外,在神經(jīng)元上未見表達(dá)。(3)各年齡組在小腦皮質(zhì)神經(jīng)元、黑質(zhì)、紋狀體等區(qū)域未見MHCI、MHCII、CD4和CD8分子的表達(dá)。 結(jié)論:(1)胚胎后期腦內(nèi)開始有MHC、CD4和CD8分子的表達(dá),表明此時(shí)腦內(nèi)已有可能出現(xiàn)免疫反應(yīng);(2)在新生鼠及出生早期,部分皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元上有MHCI類分子的表達(dá),可能與調(diào)節(jié)神經(jīng)元活動(dòng)和突觸可塑性連接有關(guān);(3)老年組大鼠MHCI類分子在海馬神經(jīng)元上的表達(dá)升高,可能與神經(jīng)元的功能衰退和記憶識(shí)別能力下降有關(guān)。 第二部分帕金森病大鼠及NSCs聯(lián)合GDNF移植后腦組織中MHC、CD4及CD8分子的表達(dá)變化 目的:觀察帕金森病(PD)模型大鼠黑質(zhì)區(qū)MHCI、CD4和CD8免疫分子的表達(dá)變化和NSCs聯(lián)合GDNF移植后移植區(qū)及免疫反應(yīng)情況并探討其意義。 方法:(1)將成功PD模型大鼠按時(shí)程分為3組:7d、14d、30d,每組4只,共12只;正常對(duì)照組4只。經(jīng)灌流取材冰凍切片,選取黑質(zhì)區(qū),采用免疫組化染色方法,檢測MHCI、CD4和CD8分子表達(dá)情況。(2)取E14.5d大鼠腹側(cè)中腦(VM)組織進(jìn)行原代培養(yǎng),經(jīng)鑒定為具有增殖分化能力的神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)后,制備成細(xì)胞懸液,加入GDNF,借助腦立體定位儀移植到PD模型大鼠的紋狀體內(nèi)。按照移植的時(shí)間點(diǎn)分為3組:2w、4w、6w,經(jīng)行為學(xué)檢測后分批處死,每組4只,共12只;假手術(shù)對(duì)照組4只。經(jīng)灌流取材冰凍切片,選取移植針道區(qū)及周圍區(qū)域,采用免疫組化染色方法,檢測MHCII、CD4和CD8分子表達(dá)情況。 結(jié)果:(1)PD模型大鼠組,MHCI、CD4和CD8陽性細(xì)胞在黑質(zhì)區(qū)可見表達(dá),與7d組比較,14d和30d組這三種陽性細(xì)胞的表達(dá)量升高(P0.05),其中30d組最高(P0.05);紋狀體區(qū)未見表達(dá);對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)均未見上述三種陽性細(xì)胞。(2)NSCs聯(lián)合GDNF組,移植區(qū)及周圍區(qū)域MHCII、CD4和CD8陽性細(xì)胞在2w組大量出現(xiàn),4w組下降(P0.05),6w組基本消失(P0.05);假手術(shù)對(duì)照組在各時(shí)間點(diǎn)均未見陽性細(xì)胞。 結(jié)論: PD模型大鼠損毀側(cè)黑質(zhì)區(qū)存在MHCI、CD4和CD8陽性細(xì)胞,可能是由于該側(cè)多巴胺(DA)能神經(jīng)元受到損害,引起周圍的小膠質(zhì)細(xì)胞等激活表達(dá)MHCI分子,同時(shí)出現(xiàn)T淋巴細(xì)胞滲透進(jìn)入黑質(zhì)區(qū),因?yàn)檫@三種陽性細(xì)胞的表達(dá)變化與同時(shí)期DA能神經(jīng)元喪失程度呈正相關(guān)。NSCs
【圖文】：

圖1：E15d大鼠海馬區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200） 圖2：E19d大鼠脈絡(luò)叢區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200）圖3：E19d大鼠海馬區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200） 圖4：E19d大鼠大腦皮質(zhì)區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200）

圖1：E15d大鼠海馬區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200） 圖2：E19d大鼠脈絡(luò)叢區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200）圖3：E19d大鼠海馬區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200） 圖4：E19d大鼠大腦皮質(zhì)區(qū)MHCI分子的表達(dá)（×200）
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 傅文玉,張進(jìn)祿,黃巖,張圣明,徐群淵,張啟東,李鋒杰;帕金森病大鼠黑質(zhì)和紋狀體神經(jīng)元的變化[J];解剖科學(xué)進(jìn)展;1997年03期

2 韓洋,曾水林,王磊,雷志年;帕金森病大鼠同種異體腦內(nèi)移植免疫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2005年01期

3 曾水林;韓洋;王磊;雷志年;朱建寶;李濤;;同種異體神經(jīng)干細(xì)胞腦內(nèi)移植免疫排斥反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2006年01期

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本文編號(hào)：2553656