【摘要】：流感病毒RNA聚合酶是由PB2,PB1,PA三個(gè)亞基組成的蛋白質(zhì)復(fù)合物,分別由流感基因片段1,2,3編碼。在流感病毒基因組RNA復(fù)制,病毒mRNA轉(zhuǎn)錄以及維持病毒生命周期中發(fā)揮著重要作用。近年來(lái)隨著對(duì)其深入研究,為抗流感病毒藥物的研制奠定了基礎(chǔ)。本文主要介紹了RNA聚合酶各個(gè)亞基的結(jié)構(gòu)、功能,亞基間相互作用以及RNA酶抑制劑的研究進(jìn)展。
【圖文】：

ChineseJournalofNewDrugs2014，23(12)1392中國(guó)新藥雜志2014年第23卷第12期圖1帽子結(jié)合區(qū)域結(jié)構(gòu)圖有研究組使用共沉淀結(jié)晶的方法獲得了PB2N-PB1C(A/PuertoＲico/8/1934)的晶體結(jié)構(gòu)，確認(rèn)了PB2亞基通過(guò)其N(xiāo)末端(1～37)氨基酸和PB1亞基C末端86個(gè)氨基酸相互連接。盡管該晶體結(jié)構(gòu)的體積較小，但是對(duì)于三聚體之間的互動(dòng)卻是必須的，同時(shí)由于它們相互作用的界面在跨種屬的禽流感和人流感毒株中卻是完全保守的，因此該相互作用位點(diǎn)也可能是一個(gè)藥物作用位點(diǎn)［8］。關(guān)于PB2亞基部分信息是在研究其在細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核之間運(yùn)輸過(guò)程中獲得的。研究表明，PB2亞基C末端(678～757)(A/PＲ8)氨基酸殘基區(qū)域存在二重核定位信號(hào)(NLS;737ＲKＲX12KＲIＲ755)，保證了ＲNA聚合酶通過(guò)核孔復(fù)合體被運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)［15］。Tarendeau等［18］沒(méi)有獲得NLS域獨(dú)立結(jié)晶(A/Victoria/3/75(H3N2))，但卻獲得了其與輸入蛋白α5(importin-α5)共結(jié)晶的X射線(xiàn)結(jié)構(gòu)圖。該研究詳細(xì)說(shuō)明了NLS二重定位特性及其與輸入蛋白-α綁定時(shí)NLS區(qū)域的構(gòu)象變化。PB2亞基與流感病毒宿主嗜性有關(guān)。用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NCBI)及全球倡議所有流感數(shù)據(jù)共享數(shù)據(jù)庫(kù)(GISAID)獲得的野生型病毒分離株進(jìn)行序列比較、分析后發(fā)現(xiàn)與宿主嗜性相關(guān)的基因主要集中在流感病毒聚合酶亞基上。其中有2個(gè)在PA亞基上，3個(gè)在PB1亞基上，13個(gè)在PB2亞基上。這與流感病毒宿主嗜性與PB2亞基上多個(gè)基因相關(guān)的研究結(jié)果相一致［7，19－21］。許多研究表明，PB2的627位可能是A型流感病毒宿主范圍的重要決定位點(diǎn)之一，對(duì)當(dāng)時(shí)所搜集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析后顯示，所有人源流感病毒PB2的627位均為K，禽源流感病毒則均為E，，因此推測(cè)PB2的

釬桑囝?個(gè)α螺旋包繞著5個(gè)β折疊組成，其α2-α5螺旋及β3折疊組成的帶負(fù)電的空腔是金屬離子的結(jié)合位點(diǎn)(圖2)。PAC端由13個(gè)α螺旋，一個(gè)短310螺旋，9個(gè)β折疊和幾個(gè)環(huán)及轉(zhuǎn)角組成。PAC端整體結(jié)構(gòu)從外觀(guān)看類(lèi)似于一個(gè)龍頭，由兩部分組成，一部分似“龍腦”，一部分似“龍嘴”。龍腦由5個(gè)α螺旋，一個(gè)短3(10)螺旋包繞著7個(gè)β折疊構(gòu)成，龍嘴由8個(gè)α螺旋，2個(gè)β折疊則構(gòu)成［39］(圖3)。通過(guò)結(jié)構(gòu)比對(duì)顯示，PAC與其他蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)無(wú)相似性，表明PAC有新的折疊。圖2PAN端結(jié)構(gòu)示意圖圖3PAc端結(jié)構(gòu)示意圖最新研究表明，PAN含有核酸內(nèi)切酶的活性位點(diǎn)，該活性可以通過(guò)金屬離子激活。Yuan等［40］(A/goose/Guangdong/1/96(H5N1))，在Mg2+存在下，得到了PA亞基N末端的晶體結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)1～197位氨基酸殘基區(qū)域存在核酸內(nèi)切酶的活性位點(diǎn)。Mg2+與電負(fù)性空穴的保守酸性氨基酸殘基相結(jié)合，相應(yīng)的氨基酸殘基發(fā)生突變會(huì)導(dǎo)致核酸內(nèi)切酶活性下降，然而復(fù)制酶的活性保持不變。Dias等［41］(A/Victoria/3/1975(H3N2))，在Mn2+離子存在下，也獲得了PA亞基N末端的晶體結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)核酸內(nèi)切酶活性位點(diǎn)存在于1～209位氨基酸殘基區(qū)，兩個(gè)Mn2+與相應(yīng)的酸性氨基酸殘基相互結(jié)合，表明核酸內(nèi)切酶是一個(gè)雙離子介導(dǎo)的作用機(jī)制。雙離子Mn2+能介導(dǎo)最佳的核酸內(nèi)切酶活性，而Mg2+介導(dǎo)
【作者單位】： 上海生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【基金】：863計(jì)劃重大項(xiàng)目(2012AA02A401) 國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2013ZX10004003)
【分類(lèi)號(hào)】：R373.13

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Mark BARTLAM;;Structure-function studies of the influenza virus RNA polymerase PA subunit[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2009年05期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 GAO George F;;It is not just AIV:From avian to swine-origin influenza virus[J];Science China(Life Sciences);2010年01期

2 ;Two special topics on the avian influenza virus and on epigenetics,have drawn much attention[J];Science China(Life Sciences);2010年12期

3 王大成;;來(lái)自禽流感病毒與表觀(guān)遺傳學(xué)的挑戰(zhàn)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2010年10期

4 蔣澄宇;;關(guān)注學(xué)科前沿,促進(jìn)學(xué)術(shù)交流——站在新起點(diǎn)的2009年Science China:Life Sciences[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2010年11期

5 吳可柱;蔣云根;李昆;;甲型H_1N_1流感病毒研究進(jìn)展[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 馬媛;H5N1流感病毒內(nèi)切酶催化水解RNA反應(yīng)機(jī)理的理論研究[D];陜西師范大學(xué);2011年

2 何雯雯;禽流感病毒HA2合成肽與M2e重組蛋白免疫保護(hù)作用的初步研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 金由辛;;T_7RNA聚合酶簡(jiǎn)介[J];生命的化學(xué);1990年06期

2 陸長(zhǎng)德;;真核DNA聚合酶命名的改變[J];生命的化學(xué);1991年01期

3 陳朝銀,劉麗,賁昆龍;棲熱菌屬熱穩(wěn)定DNA聚合酶[J];生物技術(shù);2001年04期

4 方林求;;真核生物DNA聚合酶δ[J];生命的化學(xué);1986年02期

5 李晶泉,袁曉東,王紅偉,姜明,湯敏謙;高速PCR用DNA聚合酶[J];遺傳;2000年01期

6 施產(chǎn)甫;;DNA聚合酶β在分離細(xì)胞核中的激活[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1984年03期

7 徐元根;;RNA聚合酶與啟動(dòng)因子[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);1983年03期

8 皮安平;;DNA聚合酶與DNA連接酶的作用[J];才智;2009年15期

9 陳國(guó)鳳,成軍,張玲霞,李莉;乙型肝炎病毒DNA聚合酶末端蛋白研究進(jìn)展[J];世界華人消化雜志;2004年02期

10 ;大腸桿菌中依賴(lài)于DNA的RNA聚合酶的提取[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1977年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 于漣;魏永偉;;基于T7 RNA聚合酶的傳染性法氏囊病病毒反向遺傳系統(tǒng)的建立[A];第六屆全國(guó)免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

2 沙巍;肖和平;何國(guó)鈞;翁心華;;膿腫分枝桿菌RNA聚合酶的分離純化和活性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)2008年全國(guó)結(jié)核病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

3 周海清;王晨;楊仲南;朱龍章;沈鶴柏;;基于磁性納米粒子的不對(duì)稱(chēng)聚合酶鏈反應(yīng)[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十屆膠體與界面化學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];2004年

4 余學(xué)奎;盧p樣

本文編號(hào)：2537199