【摘要】：目的：在成功建立子宮腺肌病小鼠模型的基礎(chǔ)上,通過一系列實(shí)驗(yàn)方法和療效指標(biāo),評價玄丹散結(jié)湯對腺肌病模型小鼠痛覺過敏的療效,并探討其作用機(jī)理。方法：將新生ICR小鼠隨機(jī)分為5組,設(shè)為空白組、模型組、西藥組、低劑量中藥組和高劑量中藥組,空白組為對照組,模型組、西藥組、低劑量中藥組和高劑量中藥組為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組小鼠運(yùn)用口服他莫昔芬法建立子宮腺肌病小鼠模型,3月后從模型組、西藥組、低劑量中藥組、高劑量中藥組中隨機(jī)選取6只,分別給予一定濃度的蒸餾水、達(dá)那唑、低劑量的玄丹散結(jié)湯和高劑量的玄丹散結(jié)湯灌胃。從對照組中隨機(jī)選取6只,予蒸餾水灌胃。每組小鼠每天灌胃1次,灌5天停2天,連續(xù)2月。期間通過疼痛行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(甩尾實(shí)驗(yàn)、熱板實(shí)驗(yàn)、機(jī)刺實(shí)驗(yàn)、丙酮實(shí)驗(yàn)及扭體實(shí)驗(yàn))觀察各組小鼠疼痛敏感度變化并評價玄丹散結(jié)湯的鎮(zhèn)痛效果。2月后處死小鼠,肉眼觀察子宮充血情況及體積大小,電子秤稱量子宮、卵巢重量,游標(biāo)卡尺測量子宮直徑。顯微鏡下觀察小鼠子宮病灶結(jié)節(jié)數(shù)。收集小鼠子宮組織和背根神經(jīng)節(jié),將子宮組織制成石蠟切片,行HE染色觀察子宮組織形態(tài)學(xué)變化,記錄病理評分,免疫組化、RT-PCR檢測子宮組織、背根神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)生長因子β(NGF-β)、p75神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(p75NTR)、酪氨酸激酶受體A(TrkA)蛋白及mRNA表達(dá)的情況,行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：1.疼痛行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組小鼠比對照組小鼠疼痛閾值更低,對疼痛更敏感。實(shí)驗(yàn)組之間對比,高、低劑量中藥組和西藥組小鼠的疼痛閾值比模型組高,表明玄丹散結(jié)湯和達(dá)那唑能夠緩解腺肌病模型小鼠的疼痛癥狀,降低小鼠對疼痛的敏感度。其中高劑量中藥組對小鼠疼痛閾值的提升最明顯,表明高劑量的玄丹散結(jié)湯治療效果最好。2.藥物療效結(jié)果：中藥組和西藥組均能縮小子宮體積,減輕子宮重量,改善表面充血現(xiàn)象,減少病灶節(jié)結(jié)數(shù)和降低病理評分,表明玄丹散結(jié)湯和達(dá)那唑?qū)ο偌〔∧Ｐ托∈缶行?并且高劑量的玄丹散結(jié)湯療效最佳。3.免疫組化及RT-PCR結(jié)果：子宮組織中,實(shí)驗(yàn)組與對照組比較,NGF-β、p75NTR、 TrkA蛋白及mRNA的表達(dá)水平均有顯著上調(diào)。實(shí)驗(yàn)組間比較,模型組表達(dá)水平最高,高劑量中藥組表達(dá)水平最低。背根神經(jīng)節(jié)中,實(shí)驗(yàn)組與對照組比較,p75NTR mRNA表達(dá)水平無顯著差異,TrkA mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)。實(shí)驗(yàn)組間比較,p75NTR mRNA表達(dá)水平在各組間無明顯差異,TrkA mRNA在模型組中表達(dá)最高,在高劑量中藥組中表達(dá)最低。結(jié)論：1 口服他莫昔芬法能夠成功建立子宮腺肌病動物模型,可用于臨床疾病研究2 玄丹散結(jié)湯能夠緩解腺肌病模型小鼠痛覺過敏。3 NGF及其受體可能參與了子宮腺肌病痛疼機(jī)制,玄丹散結(jié)湯緩解腺肌病疼痛可能是通過抑制腺肌病病灶中NGF及其受體的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R285.5;R-332

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本文編號：2534846