變態(tài)反應(yīng)相關(guān)分泌性中耳炎大鼠模型的建立及其機(jī)制研究

發(fā)布時間：2019-09-06 08:20

【摘要】： 目的:1,成功建立卵白蛋白致敏和激發(fā)的變態(tài)反應(yīng)相關(guān)分泌性中耳炎大鼠模型,了解其組織學(xué)變化和演變進(jìn)程。2,明確遲發(fā)相變態(tài)反應(yīng)相關(guān)細(xì)胞因子IL-4、IL-5及致炎介質(zhì)半胱氨酰白三烯在變態(tài)反應(yīng)性分泌性中耳炎的表達(dá)情況和動態(tài)變化。3,明確半胱氨酰白三烯受體在中耳組織黏膜中的表達(dá)和調(diào)節(jié)及其可能的機(jī)制,并探討半胱氨酰白三烯受體拮抗劑對細(xì)胞因子IL-4、IL-5以及黏蛋白MUC2、MUC5ACmRNA表達(dá)的抑制作用。方法:清潔級SD大鼠35只(70耳),隨機(jī)分成對照組Ⅰ(Control groupⅠ,C1)、對照組Ⅱ(Control groupⅡ,C2)、模型組(Model group, M)和干預(yù)組(Treated group,T),其中模型組又分為2天組(M1)、5天組(M2)和10天組(M3)。C1、C2、M1組各為6只,M2、M3組各為5只,T組為7只。模型建立方法采用卵白蛋白和氫氧化鋁凝膠佐劑腹腔注射系統(tǒng)致敏,1周后重復(fù)注射1次,2周后卵白蛋白經(jīng)耳泡注射激發(fā);C1組未予系統(tǒng)致敏,僅予卵白蛋白激發(fā),C2組僅給予系統(tǒng)致敏,未予卵白蛋白激發(fā);干預(yù)組于激發(fā)前2天給予孟魯司特鈉灌服(30mg/Kg),每天一次。組織化學(xué)方法觀察各組動物的組織形態(tài)學(xué)特征和變化;ELISA法檢測IL-4、IL-5、半胱氨酰白三烯在各組動物模型的表達(dá)變化,并觀察孟魯司特鈉對其影響;RT-PCR方法檢測半胱氨酰白三烯受體mRNA、黏蛋白MUC2、MUC5ACmRNA在各組動物中耳黏膜組織的表達(dá)情況和孟魯司特鈉藥物干預(yù)的影響。結(jié)果:HE染色見對照組C1、C2鼓室黏膜為假復(fù)層纖毛上皮或扁平上皮,黏膜下可見少數(shù)纖維細(xì)胞及淋巴細(xì)胞等細(xì)胞成分。咽鼓管黏膜為假復(fù)層纖毛上皮,由纖毛柱狀上皮和少量杯狀細(xì)胞組成,黏膜下為致密的纖維結(jié)締組織,無明顯炎性細(xì)胞浸潤。M1組鼓室和咽鼓管黏膜明顯增厚,部分區(qū)域上皮纖毛排列紊亂、黏膜下組織水腫疏松,可見出血、毛細(xì)血管擴(kuò)張和較多炎性細(xì)胞浸潤等病理改變。M2、M3組炎癥病理改變逐漸減輕。IL-4、IL-5、半胱氨酰白三烯中耳積液的含量模型M1組明顯增高,隨時間推移,在M2、M3組中逐漸降低。RT-PCR結(jié)果顯示半胱氨酰白三烯受體mRNA、黏蛋白MUC2、MUC5ACmRNA模型M1組表達(dá)較對照組明顯增高。干預(yù)組中耳炎癥反應(yīng)較模型組減輕,IL-4、IL-5的分泌和黏蛋白的表達(dá)減低。結(jié)論:1,中耳局部在一定條件下可產(chǎn)生足夠的免疫應(yīng)答引起變態(tài)反應(yīng)性炎癥。單次抗原激發(fā)引起的變態(tài)反應(yīng)其病理變化呈自限性過程。2,在變態(tài)反應(yīng)中,除速發(fā)相外,Th2細(xì)胞因子促發(fā)的、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等免疫反應(yīng)細(xì)胞參與的、白三烯等多種炎癥介質(zhì)為效應(yīng)的遲發(fā)相變態(tài)反應(yīng)在OME的發(fā)生中起重要作用。3,半胱氨酰白三烯受體mRNA在對照組中耳黏膜呈基礎(chǔ)性表達(dá),炎癥時表達(dá)上調(diào)。4,孟魯司特鈉可部分抑制IL-4、IL-5的分泌和黏蛋白的表達(dá),減輕中耳炎癥反應(yīng)。
【圖文】：