【摘要】： 目的 探討建立同種異體大鼠骨髓及肝聯(lián)合移植動物模型的方法，初步研究提高大鼠肝移植模型的穩(wěn)定性和動物存活率的方法及可行性。 方法 將SD大鼠(♂)、Wistar大鼠(♀)分成三組：Ⅰ組大鼠Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植；Ⅱ組Wistar大鼠(♀)TBI(11Gy)，4小時后輸入SD大鼠(♂)BMC(8×10~7)，28天后Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植；Ⅲ組Wistar大鼠(♀)TBI(7Gy)，4小時后輸入SD大鼠(♂)BMC(8×10~7)，2天后CTX(50 mg／kg)腹腔注射，28天后Kamada“二袖套法”行SD→Wistar大鼠肝移植。分別于BMT后10，20天通過PCR方法檢測Ⅱ組和Ⅲ組Wistar大鼠體內(nèi)的SD大鼠源性Y染色體特異性片段，并比較三組大鼠肝移植術(shù)后1周生存率、生存狀況及生存時間。 結(jié)果 Ⅱ組和Ⅲ組大鼠外周血均檢測出SD大鼠源性嵌合體。DTH檢查顯示對SD大鼠產(chǎn)生免疫耐受。肝移植結(jié)果顯示：Ⅰ組大鼠均在4～5d死亡，而Ⅱ組和Ⅲ組大鼠1周存活率為80％和84.2％，但Ⅱ組的生存狀況不如Ⅲ組。 結(jié)論 應(yīng)用7GyTBI＋CTX＋供體BMT可成功建立同種異體大鼠嵌合體模型，誘導特異性免疫耐受，大大提高肝移植術(shù)后大鼠的生存狀況及生存時間。
【圖文】：

IVC)套管，分別采用血管穿刺管外鞘管制成，長約4Inln，外徑分別為2.1二和2.7Inln，管體與管柄各半，管體中段環(huán)形刻下淺槽，以防血管套上后滑脫并有利于固定結(jié)扎線。膽總管插管采用硬膜外麻醉導管，長約3Inln(見圖1)。采用上海手術(shù)器械廠的顯微外科手術(shù)器械包， Satinsky鉗，5一0、7一0醫(yī)用無損傷縫合針線，，在手術(shù)顯微鏡下雙人操作完成。肝下下腔靜脈套管價睜脈龔管膽總管捅管圖1各種套管示意圖(二)供肝的獲取:供體采用10%水合氯醛0.2一0.39/kg作腹腔注射麻醉。仰臥位，固定四肢。腹部去毛，3%碘伏消毒。十字切口入腹。分別以濕潤的棉簽和鹽水小紗布作鈍性分離和輔助暴露，避免用手或手指在腹腔內(nèi)粗暴操作。游離肝下下腔靜脈，結(jié)扎右腎上腺靜脈，并切斷右腎動靜脈。順時針方向游離肝周韌帶，近肝側(cè)結(jié)扎并離斷左隔下靜脈，結(jié)扎并切斷左肝至食管高位血管支

緊貼隔肌環(huán)剪去隔肌水平以上SVC及隔肌組織，僅保留隔肌環(huán)。SVC左右兩側(cè)7一0無損傷縫線各縫1針。修整IVC及PV，在4℃乳酸林格液中將門靜脈與肝下下腔靜脈壁外翻，分別套在自制的聚乙烯管上，用5一0絲線環(huán)扎固定，完成袖套制備(見圖2)。冶圖2袖套制備示意圖(四)受體原位肝移植:大鼠麻醉后，上腹部直切口入腹，采用自制拉鉤，腰橋充分暴露手術(shù)野。分步游離受體肝臟，游離完畢后將受體肝臟取出。將供肝自4℃乳酸林格液保存液中取出置于受體原位，冰生理鹽水紗布覆蓋肝臟，并間斷用冰生理鹽水沖洗肝臟表面，7一0無損傷線吻合肝上下腔靜脈，一般先縫合后壁，再縫合前壁，吻合時，向肝上下腔靜脈內(nèi)注入4℃生理鹽水，驅(qū)出血管腔內(nèi)的空氣(見圖3)。吻合成功后，經(jīng)門靜脈向供肝內(nèi)灌注4℃生理鹽水10ml，排除肝內(nèi)的肝素乳酸林格液，夾閉肝下下腔靜脈，將供肝門靜脈套管插入受體門靜脈內(nèi)
【學位授予單位】：福建醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R-332;R617

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 張臨友,李剛;嵌合與移植[J];國外醫(yī)學(免疫學分冊);2000年01期

2 徐峰;楊甲梅;闞彤;嚴以群;吳孟超;;改良Kamada法大鼠原位肝移植模型的建立[J];中華肝膽外科雜志;2001年12期

3 王軒,楊甲梅,嚴以群,姚曉平,吳孟超;大鼠原位肝移植不同術(shù)式的探討[J];中華器官移植雜志;1998年02期

4 李濤,唐華美,孫星,彭志海;“二袖套法”大鼠原位肝移植的技術(shù)改進[J];中國普通外科雜志;2005年07期

本文編號：2529711