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細粒棘球絳蟲重組BCG-Eg95疫苗構(gòu)建及其免疫機制研究

發(fā)布時間:2019-08-01 11:53
【摘要】: 目的 制作細粒棘球蚴BALB/c鼠模型,從細粒棘球絳蟲原頭節(jié)擴增Eg95蛋白編碼基因,克隆入大腸桿菌-分枝桿菌穿梭載體pBCG,電穿孔轉(zhuǎn)化BCG,構(gòu)建細粒棘球絳蟲重組BCG-Eg95疫苗,探討Eg95抗原在重組BCG中的表達效率;用該疫苗免疫BALB/c小鼠,動態(tài)觀察免疫小鼠血清IgEIgG及其亞類的變化規(guī)O摚黃細胞CD4+和CD8+亞群變化,以及脾細胞培養(yǎng)上清液IL-2IL-4IFN-γ和TNF-α變化水平;通過不同的免疫途徑接種疫苗,在原頭節(jié)攻擊后,觀察實驗動物產(chǎn)生的保護力和檢測血清IgEIgG及其亞類;脾T細胞CD4+和CD8+亞群變化,脾細胞培養(yǎng)上清液IL-2IL-4IFN-γ和TNF-α水平,以及脾細胞的凋亡,從而初步闡述其保護性免疫機制,為CE疫苗的開發(fā)利用提供依據(jù)。 方法 以BALB/c鼠作為宿主,用腹腔注射Eg原頭節(jié)的方法制作細粒棘球蚴BALB/c模型。從Eg包囊中分離原頭節(jié),超聲粉碎后抽提總RNA作為模板。根據(jù)Genbank(AF199354)基因序列,自行設(shè)計一對引物并加入內(nèi)切酶位點,采用RT-PCR方法擴增Eg95編碼基因并鑒定,將
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2006
【分類號】:R392

【參考文獻】

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10 李文桂,石佑恩,汪燕鳴,劉國元,韓家俊,寧長修,鄧偉文;血吸蟲重組BCG-Sj26GST疫苗接種后保護力的觀察[J];同濟醫(yī)科大學學報;1999年01期

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本文編號:2521731

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