【摘要】： 第一部分Genistein對(duì)MPP~+損傷的多巴胺能神經(jīng)元及突觸素的影響 目的：探討genistein(GST)對(duì)離體培養(yǎng)的帕金森病模型多巴胺能神經(jīng)元以及突觸素表達(dá)的影響。方法：取孕14～16天SD大鼠胚胎中腦腹側(cè)，常規(guī)體外培養(yǎng)。將培養(yǎng)的中腦腹側(cè)細(xì)胞分為四組：正常對(duì)照組、E_2+MPP~+組、GST+MPP~+組、MPP~+組。用TH和突觸素(synaptophysin，SYN)免疫熒光染色，觀察各組TH陽性神經(jīng)元的生長狀況以及突觸素的表達(dá)：用MAP-2免疫熒光染色，觀察各組神經(jīng)元的生長狀況。用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測(cè)定細(xì)胞活力和代謝狀態(tài)。結(jié)果：與正常對(duì)照組、E_2+Mpp~+組以及GST+Mpp~+組相比，MPP~+組TH陽性神經(jīng)元數(shù)量少，SYN免疫活性產(chǎn)物表達(dá)亦減少，MAP-2陽性神經(jīng)元減少，細(xì)胞活力差，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而E_2+MPP~+組、GST+MPP~+組中上述指標(biāo)與正常對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：Genistein對(duì)體外培養(yǎng)的多巴胺能神經(jīng)元具有類似雌激素樣的神經(jīng)保護(hù)作用。 第二部分Tamoxinfen阻斷雌激素受體后genistein對(duì)多巴胺能神經(jīng)元及促凋亡蛋白bax表達(dá)的影響 目的：探討tamoxinfen(TAM，它莫西芬)阻斷ER后，GST對(duì)離體培養(yǎng)的帕金森病模型多巴胺能神經(jīng)元以及促凋亡蛋白bax表達(dá)的影響。方法：取孕14～16天SD大鼠胚胎中腦腹側(cè)，常規(guī)體外培養(yǎng)。將培養(yǎng)的中腦腹側(cè)細(xì)胞分為四組：正常對(duì)照組、GST+MPP~+組、TAM+GST+MPP~+組、MPP~+組。用TH免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察各組TH陽性神經(jīng)元的生長狀況。用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測(cè)定細(xì)胞活力和代謝狀態(tài)。用Western Blot觀察各組bax蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果：TAM+GST+MPP~+組與正常對(duì)照組和GST+MPP~+組相比，TH陽性神經(jīng)元數(shù)量有所減少，突起長度變短，bax蛋白的表達(dá)量增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TAM+GST+MPP~+組與正常對(duì)照組和GST+MPP~+組相比，細(xì)胞活力差，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)MPP~+組與正常對(duì)照組，E_2+MPP~+組以及TAM+GST+MPP~+組相比，TH陽性神經(jīng)元數(shù)量減少，突起長度短，bax蛋白的表達(dá)量最多，細(xì)胞活力最差，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：TAM具有部分下調(diào)GST對(duì)多巴胺能神經(jīng)元保護(hù)作用的功能；GST在體外對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用除了通過ER發(fā)揮類雌激素樣保護(hù)作用外，還可能經(jīng)其他途徑發(fā)揮保護(hù)作用；bax蛋白在神經(jīng)元受損后表達(dá)增加，表明bax在多巴胺能神經(jīng)元的凋亡過程中起重要的作用。
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圖片說明： 大學(xué)碩十學(xué)位論文第二△TAM+GST+MPP+組與正常對(duì)照組和GST+MPP十組比較，P<0.05*MPP+組與正常對(duì)照組、GST+MPP+組和TAM+GST+Mpp+組比較P<0.05。三)WestemBlot結(jié)果(見圖11)三次凝膠電泳結(jié)果均顯示，，MPP+組的bax蛋白表達(dá)明顯增GST+MPP十組TAM+GST+MPP+組和正常對(duì)照組相比，有明異。GST+MPP+組與正常對(duì)照組相比無明顯的差異，飛人M+MPP+組與正常對(duì)照組和GST+MPP+組相比有明顯的差異，各對(duì)灰度值見表6:
文內(nèi)圖片：
圖片說明：7B，7C，7D:分別示正常對(duì)照組、GST十MPP十組、TAM十GST+N田P十組、N于P+組單極突起TH陽性神經(jīng)元B護(hù)50pm
【學(xué)位授予單位】：南通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R338

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本文編號(hào)：2515457