【摘要】： PARTⅠ人偏肺病毒分離株蛋白質(zhì)特性的初步探討 目的:分析新近發(fā)現(xiàn)的兒童呼吸道病毒病原——人偏肺病毒(Human metapneumovirus, hMPV)中國大陸流行株,初步明確人偏肺病毒(human metapneumovirus ,hMPV)主要蛋白質(zhì)的基本特性。 方法:以純化的hMPV重慶分離株CHN05-01滅活病毒為抗原,免疫家兔獲得抗血清。用此抗血清為一抗通過免疫印跡法檢測hMPV蛋白。用NetNGlyc 1.0 Server、NetOGlyc 3.1 Server、NetPhos 2.0 Server分析hMPV A亞型標(biāo)準(zhǔn)株CAN97-83氨基酸序列,預(yù)測hMPV蛋白氨基酸序列中可能的糖基化、磷酸化位點(diǎn)。 結(jié)果:ELISA檢測顯示所制備的抗血清與hMPV的蛋白反應(yīng)效價(jià)達(dá)1:500以上,可有效識別hMPV蛋白。軟件分析示G蛋白糖基化位點(diǎn)最多,而P蛋白磷酸化位點(diǎn)最多。以兔抗hMPV血清為一抗的免疫印跡法提示CHN05-01的G蛋白糖基化水平較一致,與CAN99-80和CAN99-81不同,其分子量介于55至72kDa之間,約68 kDa;F蛋白F1亞單位分子量介于40至55kDa,約為48 kDa。 結(jié)論:初步明確了hMPV兩個主要膜表面糖蛋白的分子量和糖化特點(diǎn),為后續(xù)蛋白功能研究奠定了基礎(chǔ)。 PARTⅡ人偏肺病毒F蛋白的糖基化和磷酸化位點(diǎn)預(yù)測 目的:預(yù)測人偏肺病毒F蛋白的糖基化、磷酸化位點(diǎn)。 方法:應(yīng)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析預(yù)測hMPV 4亞型代表株F蛋白氨基酸序列的N-連接、O-連接糖基化位點(diǎn)、賴氨酸殘基的ε氨基的糖基化位點(diǎn)和磷酸化位點(diǎn)。 結(jié)果: 4亞型代表株F蛋白均有的保守N-連接糖基化位點(diǎn)、賴氨酸殘基ε氨基的糖基化位點(diǎn)和磷酸化位點(diǎn)。無相同的保守的O-連接糖基化位點(diǎn)。A2亞型株4個區(qū)段可能無糖基化和磷酸化位點(diǎn)。 結(jié)論:應(yīng)用神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析預(yù)測了F蛋白的糖基化和磷酸化位點(diǎn),為進(jìn)一步研究hMPV蛋白糖基化的功能及免疫學(xué)意義的研究奠定了理論基礎(chǔ),獲得了多肽疫苗開發(fā)的不需修飾的候選區(qū)。
[Abstract]:A preliminary study on the protein characteristics of PART 鈪，

本文編號：2419492