發(fā)布時(shí)間：2019-01-13 08:50

【摘要】：【目的】比較恒定鏈(invariant chain,Ii)CLIP的2個(gè)片段(PBS、GBS)影響免疫載體增強(qiáng)體液免疫的效果。【方法】首先,構(gòu)建了基于小鼠Ii功能片段與新城疫病毒抗原肽F2的6個(gè)嵌合體(Cyt/TM/F2、Cyt/TM/F2/GBS、Cyt/TM/PBS/F2、Cyt/TM/F2/TRIM、Cyt/TM/F2/GBS/TRIM、Cyt/TM/PBS/F2/TRIM);其次,定向克隆至原核表達(dá)載體pET-32a中,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta(DE3)誘導(dǎo)表達(dá)和純化目的蛋白;最后,免疫小鼠,經(jīng)間接ELISA法測(cè)定血清抗體效價(jià),以及比較分析不同嵌合體免疫組免疫效果。【結(jié)果】一是所構(gòu)建的含不同Ii功能片段/F2嵌合體的6個(gè)免疫組,均比單獨(dú)F2的免疫組提高抗體水平1.5-4.9倍;二是在上述6個(gè)免疫組中,含CLIP的PBS或GBS的免疫組比不含CLIP的免疫組增強(qiáng)1.6-2.4倍;三是含PBS比含GBS的免疫組增強(qiáng)1.5倍。【結(jié)論】Ii胞漿區(qū)、跨膜區(qū)具有增強(qiáng)免疫效果的作用,而CLIP的PBS在Ii免疫載體中的作用優(yōu)于GBS。
[Abstract]:[objective] to compare the effects of two fragments (PBS,GBS) of invariant chain,Ii CLIP on the enhancement of humoral immunity by immune vectors. Six chimerism (Cyt/TM/F2,Cyt/TM/F2/GBS,Cyt/TM/PBS/F2,Cyt/TM/F2/TRIM,Cyt/TM/F2/GBS/TRIM,) based on mouse Ii functional fragment and Newcastle disease virus peptide F2 were constructed. Cyt/TM/PBS/F2/TRIM); Secondly, it was cloned into prokaryotic expression vector pET-32a and transformed into Escherichia coli Rosetta (DE3) to induce expression and purification of the target protein. Finally, the antibody titers of serum were determined by indirect ELISA assay, and the immune effects of different chimeric immune groups were compared and analyzed. [results] one of the six immune groups with different Ii functional fragments / F2 chimerism was constructed. The antibody level was 1.5-4.9 times higher than that of F2 immunized group. Second, the PBS or GBS immunized with CLIP was 1.6-2.4 times higher than that without CLIP in the above six immunization groups. [conclusion] the cytoplasmic domain and transmembrane region of Ii have the effect of enhancing immunity, and PBS of CLIP is superior to GBS. in Ii immune vector.
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 安徽省人畜共患病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31172306)~~
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2408287