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腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子在體外培養(yǎng)大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元低氧適應(yīng)中的保護作用

發(fā)布時間:2018-12-11 03:16
【摘要】:第一部分:大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞的原代培養(yǎng)、鑒定和缺氧模型的建立 目的:進行大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)和鑒定,并建立大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)的缺氧模型。 方法:(1)運用胰蛋白酶和DNase Ⅰ聯(lián)合酶消化法,選擇合適孔徑的篩網(wǎng)過濾,,并以L-多聚賴氨酸作為神經(jīng)元體外培養(yǎng)的生長基質(zhì),進行大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元的體外培養(yǎng);(2)運用免疫熒光組織化學(xué)方法檢測神經(jīng)元特異的抗TubulinβⅢ單克隆抗體和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特異的抗GFAP多克隆抗體分別進行神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定,檢測體外培養(yǎng)大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞的純度;(3)運用國產(chǎn)厭氧培養(yǎng)箱在37℃含85%N_2、5%CO_2、10%H_2混合氣體環(huán)境下建立大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞的缺氧模型。 結(jié)果:(1)通過體外培養(yǎng)獲得了純度達(dá)95%以上的大鼠胚腦皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞;(2)運用神經(jīng)元特異的抗TubulinβⅢ單克隆抗體和神
[Abstract]:The first part: primary culture, identification and anoxic model of rat embryonic cortical neurons objective: culture and identification of rat embryonic cortical neurons, An anoxic model of cultured rat embryonic cortical neurons was established. Methods: (1) the rat embryonic cortical neurons were cultured in vitro using trypsin and DNase 鈪

本文編號:2371766

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