【摘要】：目的制備抗人糖抗原19-9(CA19-9)單克隆抗體(mAb),建立雙抗體夾心檢測CA19-9化學(xué)發(fā)光體系。方法 CA19-9免疫小鼠后,通過細(xì)胞融合技術(shù),獲得抗CA19-9的mAb。鑒定其抗體的純度、效價、特異性和配對,建立雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光體系。在包被緩沖液、包被濃度及加樣模式上優(yōu)化化學(xué)發(fā)光體系,對該體系進(jìn)行準(zhǔn)確度、最低檢測限、線性、重復(fù)性評估以及血清樣本的檢測。結(jié)果獲得4株名稱為#1-1、#2-1、#3-1和#4-1的mAb�？贵w效價均大于10-8,與CA125、CA15-3、CA72-4均無交叉反應(yīng)。其中#3-1 mAb與#2-1-HRP建立的雙抗體夾心體系經(jīng)優(yōu)化后,其檢測范圍為0~1 000 U/mL;最低檢測限為2.0 U/mL;線性相關(guān)系數(shù)為0.9999。與羅氏試劑檢測結(jié)果對比,Kappa系數(shù)大于0.75;相關(guān)系數(shù)大于0.9。結(jié)論成功制備了抗人CA19-9 mAb,建立了雙抗體夾心檢測CA19-9化學(xué)發(fā)光體系。
[Abstract]:Aim to prepare anti-human glucose antigen 19-9 (CA19-9) monoclonal antibody (mAb), and to establish a double antibody sandwich system for the detection of CA19-9 chemiluminescence. Methods after immunizing mice with CA19-9, mAb. against CA19-9 was obtained by cell fusion technique. The purity, titer, specificity and pairing of the antibody were identified and a double antibody sandwich chemiluminescence system was established. The chemiluminescence system was optimized in the buffer solution, the coating concentration and the sample mode. The accuracy, the minimum detection limit, the linearity, the repeatability and the detection of serum samples were evaluated. Results four mAb. strains named # 1-1 #2-1 #3-1 and # 4-1 were obtained. The antibody titers were higher than 10-8, and there was no cross reaction with CA125,CA15-3,CA72-4. The detection range of the double antibody sandwich system established by # 3-1 mAb and # 2-1-HRP is 0 ~ 1 000 U / mL, the lowest detection limit is 2.0 U / mL, and the linear correlation coefficient is 0.9999 9. Compared with the results of Roche reagent, the Kappa coefficient was greater than 0.75 and the correlation coefficient was greater than 0.9. Conclusion the double antibody sandwich system for the detection of CA19-9 chemiluminescence was successfully prepared by anti-human CA19-9 mAb,.
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;大慶麥伯康生物技術(shù)有限公司;東北林業(yè)大學(xué)大慶生物技術(shù)研究院;
【基金】：黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)項目(GC13C122) 黑龍江省發(fā)展高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)專項資金(FW11C201)
【分類號】：R392.1

【參考文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：2331013