HIV多表位核酸疫苗免疫實(shí)驗(yàn)及雞痘病毒轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建研究
本文選題:HIV 切入點(diǎn):多表位基因 出處:《吉林大學(xué)》2007年碩士論文
【摘要】: 本研究利用已經(jīng)設(shè)計(jì)并人工合成的多表位基因,以HIV-1巨分子顆粒p24為支架,連入安全的真核表達(dá)載體質(zhì)粒pVAX1,構(gòu)建了新型HIV多表位重組DNA疫苗(pVAX1-MEGN-p24),細(xì)胞轉(zhuǎn)染結(jié)果表明,pVAX1-MEGN-p24成功地表達(dá)了MEGNp24抗原蛋白。將該重組質(zhì)粒免疫小鼠,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,該重組質(zhì)粒能夠誘導(dǎo)免疫小鼠產(chǎn)生針對HIV細(xì)胞免疫和體液免疫,并且以細(xì)胞免疫為主。佐劑重組核酸疫苗組具有穩(wěn)定的特異性CTL反應(yīng)作用。 本研究還構(gòu)建了新型雞痘病毒轉(zhuǎn)移載體,并利用該載體獲得了一株含HIV多表位基因的重組雞痘病毒株,運(yùn)用RT-PCR和IFA方法檢測了外源基因重組及雞痘病毒在雞胚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)狀況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,外源基因已正確重組入雞痘病毒基因組,且可在雞胚成纖維細(xì)胞中進(jìn)行有效表達(dá)。
[Abstract]:This study has been designed and synthesized by the multi epitope gene, with HIV-1 macromolecule particle p24 as scaffold, even into the safety of eukaryotic expression plasmid pVAX1 to construct a new HIV recombinant multi epitope DNA vaccine (pVAX1-MEGN-p24), cell transfection results showed that pVAX1-MEGN-p24 was successfully expressed in the MEGNp24 antigen protein. The recombinant plasmid in mice, experimental results showed that the recombinant plasmid could induce mice immunized against HIV cell immunity and humoral immunity, and the immune cells. The recombinant DNA vaccine adjuvant group with specific CTL reaction stability.
This study also constructed a new type of fowlpox virus vector, and the vector was obtained with HIV multi epitope recombinant fowlpox virus strain gene, using RT-PCR and IFA method for detection of recombinant fowlpox virus and expression of exogenous gene into cells in chicken embryo fiber. The experimental results showed that the exogenous gene has the correct recombinant the fowlpox virus genome, and in chick embryo fibroblasts express effectively.
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2007
【分類號】:R392;Q78
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,本文編號:1665837
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