本文選題：聚合酶鏈反應　切入點：豫醫(yī)無毛小鼠　出處：《鄭州大學》2006年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：采用高度近交的動物可以減少實驗動物數(shù)量和實驗重復次數(shù)，提高實驗結(jié)果的準確性、可比性和可重復性。近交系動物的顯著特征是基因純合性及遺傳穩(wěn)定性，但在培育、保種及繁殖生產(chǎn)過程中，存在著發(fā)生遺傳變異或遺傳污染的可能，所以，需要對近交系小鼠進行嚴格、長期、定時的遺傳監(jiān)測。傳統(tǒng)的皮膚移植、生化標記等通過檢測其表型變化來推測其基因變化的方法有明顯的局限性，而微衛(wèi)星DNA多態(tài)性高、分布廣、數(shù)目多、比較穩(wěn)定、易于擴增，可直接檢測DNA水平基因變化，能夠更全面地反映基因組的遺傳概貌及變異情況，且微衛(wèi)星DNA具有檢測靈敏、特異、簡便、省時等優(yōu)點，所以，它將成為近交系動物較理想的遺傳監(jiān)測標記。豫醫(yī)無毛小鼠(Yuyi Hairless Mice，簡稱YYHL小鼠)是河南省實驗動物中心1990年在昆明小鼠繁育過程中發(fā)現(xiàn)的小鼠突變種群，是不同于裸鼠的一種皮膚和毛發(fā)結(jié)構(gòu)發(fā)生遺傳突變的新品系。近交系YYHL小鼠被廣泛應用于組織學、腫瘤病因?qū)W和腫瘤治療等方面，但在皮膚老化、脫發(fā)等皮膚病變及化妝品、外用藥品的檢測等臨床研究中更具有代表性，是非常理想的實驗材料。 但有關近交系YYHL小鼠在分子生物學遺傳監(jiān)測方面的研究較少。本實驗采用18對引物對近交系小鼠的DNA多態(tài)性進行研究：提取小鼠基因組DNA并利用微衛(wèi)星引物PCR擴增，通過瓊脂糖凝膠電泳、圖像分析儀觀察有無擴增產(chǎn)物，然后再通過聚丙烯酰胺凝膠電泳及銀染等技術顯示微衛(wèi)星DNA擴增產(chǎn)物。最后采用遺傳學數(shù)據(jù)分析方法進行分析，以期篩選出具有較高多態(tài)性的微衛(wèi)星位點，用于近交系小鼠的遺傳背景監(jiān)測。 方法：選用七品系近交系小鼠(BALB／C、YYHL小鼠、C57、CBA、DBA／2、C3H／HeJ、
[Abstract]:Objective: using highly inbred animals can reduce the number of experimental animals and increase the accuracy, comparability and repeatability of experimental results. The significant characteristics of inbred animals are genetic homozygosity and genetic stability. However, in the process of breeding, preserving and breeding, there is the possibility of genetic variation or genetic contamination. Therefore, it is necessary to carry out strict, long-term and regular genetic monitoring of inbred mice. Biochemical markers and other methods to detect phenotypic changes have obvious limitations, while microsatellite DNA is highly polymorphic, widely distributed, numerous, stable and easy to amplify, and can be directly detected for gene changes at DNA level. Microsatellite DNA has the advantages of sensitivity, specificity, simplicity and time saving. It will be an ideal genetic monitoring marker for inbred animals. Yuyi Hairless Mice (YYHL mouse) is a mutated mouse population discovered in Kunming mouse breeding process in 1990 by Henan Provincial Laboratory Animal Center. Inbred YYHL mice are widely used in histology, tumor etiology and tumor therapy, but in skin aging, alopecia and other skin diseases and cosmetics. The detection of external medicine is more representative in clinical research, and it is a very ideal experimental material. In this study, 18 pairs of primers were used to study the DNA polymorphism of inbred YYHL mice. Genomic DNA was extracted from mice and amplified by microsatellite primer PCR. Agarose gel electrophoresis and image analyzer were used to observe the amplification products, and then polyacrylamide gel electrophoresis and silver staining were used to show the microsatellite DNA amplification products. The aim of this study was to screen microsatellite loci with high polymorphism for genetic background monitoring in inbred mice. Methods: seven inbred strain mice, BALB / Cnyyhl mice, C57 / CBA / DBA / 2 / C3H / HeJ, were used.
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2006
【分類號】：R-332

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