本文關(guān)鍵詞：中東呼吸綜合征冠狀病毒多重?zé)晒舛縍T-PCR檢測技術(shù)的建立

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【摘要】：建立中東呼吸系統(tǒng)綜合征冠狀病毒(MERS-CoV)感染的篩查與診斷應(yīng)用的核酸檢測方法。本研究建立了基于MERS-CoV三個分子靶標(upE,ORF1b,N2)的雙重以及三重的三種熒光定量RT-PCR檢測技術(shù)方法,分別與前期建立的單重?zé)晒舛縍T-PCR(upE或N2)檢測方法做了比較,并且采用MERS-CoV病毒毒株、上海提供的口岸發(fā)燒病人樣本以及由首例中國MERS-CoV韓國地區(qū)輸入病例的咽拭子樣品和全血的樣品做了臨床驗證。結(jié)果顯示:采用MERS-CoV病毒毒株作為模板,三種新建立的多重檢測方法與單重?zé)晒舛縍T-PCR檢測方法最低檢測限均能達到10PFU/mL,且與其他常見呼吸道病毒的陽性樣本均無交叉反應(yīng),特異性良好。對臨床樣品的驗證中,上海病人咽拭子樣本均為陰性,而中國首例MERS輸入病例的急性期咽拭子樣品均為陽性,而全血樣的檢測結(jié)果顯示N2靶標有較高檢出率,明顯優(yōu)于基于upE單一靶標。本研究所建立的基于MERS-CoV三個分子靶標(upE,ORF1b,N2)的雙重以及三重?zé)晒舛縍T-PCR檢測技術(shù)方法用于MERS-CoV感染的實驗室診斷,具有較高靈敏度與特異性及適用性。
【作者單位】： 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)病毒和病毒病重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 中東呼吸系統(tǒng)綜合征 冠狀病毒 熒光定量RT-PCR 多重 檢測
【基金】：傳染病重大專項(2014ZX10004-001,201310004-101,2013ZX10004601)
【分類號】：R373.9;R440
【正文快照】： 中東呼吸綜合征(Middle East respiratorysyndrome,MERS)是由中東呼吸綜合征冠狀病毒(MERS coronavirus,MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道傳染病,是繼嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)后的一種新發(fā)現(xiàn)的感染力強、病死率高、

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本文編號：989676