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歐洲型PRRSV、PCV2重組痘病毒疫苗灌注式生物反應(yīng)器培養(yǎng)工藝的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-10-07 17:48

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【摘要】:目的利用微載體-生物反應(yīng)器技術(shù)培養(yǎng)乳倉鼠腎細(xì)胞,接種重組痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,建立規(guī);苽錃W洲型PRRSV、PCV2重組痘病毒疫苗的灌注式生產(chǎn)工藝。方法利用2L體積灌注式生物反應(yīng)器培養(yǎng)BHK細(xì)胞,設(shè)定培養(yǎng)參數(shù)為溫度37℃、溶氧度(DO)為60%,轉(zhuǎn)速為80r/min,pH值為7.3。當(dāng)90%微載體表面貼滿BHK細(xì)胞時(shí)以0.1MOI的感染劑量接種重組痘病毒rVTT-ORF2-EUO3O5,設(shè)定感染參數(shù)為溫度35℃、DO為50%、轉(zhuǎn)速為50r/min,pH值為7.1,繼續(xù)培養(yǎng)觀察。結(jié)果在采用灌注式生物反應(yīng)器技術(shù)制備重組痘病毒過程中的細(xì)胞培養(yǎng)階段,細(xì)胞培養(yǎng)96h可獲得1.587×1010個(gè)細(xì)胞數(shù),細(xì)胞增殖39.67倍;在病毒增殖階段,微載體上細(xì)胞完全脫落時(shí)的病毒滴度為2.12×109 PFU/ml。結(jié)論成功建立了歐洲型PRRSV、PCV2重組痘苗病毒灌注式生產(chǎn)工藝,為規(guī);苽渲亟M痘病毒疫苗提供了技術(shù)參數(shù)。
【作者單位】: 中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】歐洲型PRRSV PCV 重組痘苗病毒 生物反應(yīng)器 灌注式生產(chǎn)工藝
【基金】:科技部863項(xiàng)目(No.2011AA10A208) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.20140309024NY)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: *?**?豬繁殖與呼吸綜合征(俗稱藍(lán)耳病)病毒(Por-cine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),隸屬于動(dòng)脈炎病毒科,呈二十面立體對(duì)稱,內(nèi)含單股線狀正鏈基因組RNA,長(zhǎng)約15.1kb,主要引起懷孕母豬繁殖障礙和仔豬呼吸困難[1-2]。PRRSV主要引起母豬流產(chǎn),仔豬嚴(yán)重呼吸疾

【相似文獻(xiàn)】

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號(hào):989240

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