本文關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌臨床菌株的分離培養(yǎng)和鑒定

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【摘要】：目的:建立一種幽門螺桿菌(H.pylori)臨床菌株的分離培養(yǎng)的方法。方法:取臨床胃黏膜組織標(biāo)本88株,接種于10%綿羊全血的哥倫比亞選擇性培養(yǎng)基上,37℃、5%O2、10%CO2、85%N2培養(yǎng)3~5 d后,挑取血平板上透明細(xì)小可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色和尿素酶試驗,對陽性菌落進(jìn)行擴大純培養(yǎng),提取細(xì)菌DNA,PCR擴增H.pylori 16sRNA、Cag A基因,電泳并進(jìn)行測序鑒定。結(jié)果:成功從臨床胃黏膜組織中分離培養(yǎng)出H.pylori,88例胃黏膜組織標(biāo)本中分離培養(yǎng)并鑒定出H.pylori 19株,陽性率為22%;對16sRNA及Cag A基因進(jìn)行擴增,電泳可見目的條帶,并對16sRNA擴增產(chǎn)物測序,與H.pylori國際標(biāo)準(zhǔn)菌株26695比對,同源性為95%~99%。結(jié)論:37℃、5%O2、10%CO2、85%N2條件下10%綿羊全血的哥倫比亞選擇性培養(yǎng)基上能成功分離培養(yǎng)出H.pylori臨床株。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué);貴州醫(yī)科大學(xué)分子生物學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 幽門螺桿菌 分離培養(yǎng) 臨床菌株 革蘭染色 CagA基因
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81260303)
【分類號】：R378.2
【正文快照】： 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是一種呈螺旋狀或S形、微需氧的革蘭氏陰性桿菌,由澳大利亞科學(xué)家Mashall和Warren于1983年從慢性胃炎病人的胃黏膜中首次分離并成功培養(yǎng)[1-2]。H.pylori是全球最常見的感染性病原菌之一,是慢性胃炎、胃潰瘍的主要致病因素[3-4],與胃

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本文編號：851997