本文關(guān)鍵詞：化膿性鏈球菌溶血素O活性結(jié)構(gòu)重組蛋白的制備

  更多相關(guān)文章： 化膿性鏈球菌 鏈球菌溶血素O重組蛋白 多克隆抗體

【摘要】：生物信息分析化膿性鏈球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白結(jié)構(gòu)表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸殘基組成的溶血活性結(jié)構(gòu)域Thiol_cytolysin外,在N端還有一跨膜結(jié)構(gòu)域。利用pET101-GENE蛋白表達(dá)系統(tǒng),成功構(gòu)建出表達(dá)具有Slo活性重組蛋白的重組子,采用鎳柱親和層析分離技術(shù),純化目的蛋白;純化蛋白SDS-PAGE檢測(cè)分析表明,重組蛋白與預(yù)測(cè)的溶血活性結(jié)構(gòu)域的分子量相一致;溶血實(shí)驗(yàn)顯示,純化重組蛋白具有溶血活性。以純化的重組蛋白為免疫原,對(duì)大鼠進(jìn)行4次免疫,所獲得免疫血清經(jīng)Elisa檢測(cè),抗Slo血清效價(jià)達(dá)到1∶12 800;Western blot檢測(cè)豬鏈球菌、馬鏈球菌和化膿性鏈球菌中的鏈球菌溶血素結(jié)果顯示,抗Slo多克隆抗體僅能與化膿性鏈球菌溶血素O發(fā)生反應(yīng),表明研究制備的化膿性鏈球菌溶血素O活性結(jié)構(gòu)重組蛋白抗原具有較好的特異性,所制備的抗原Slo可用于進(jìn)一步開發(fā)抗鏈球菌溶血素O(ASO)試劑盒。
【作者單位】： 西南交通大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 化膿性鏈球菌 鏈球菌溶血素O重組蛋白 多克隆抗體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31070117) 四川省科技支撐項(xiàng)目(2012FZ0048) 國(guó)家大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(201510613062)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 化膿性鏈球菌(Streptococcus pyogenes)又稱A族鏈球菌(Group A Streptococci,GAS),是一種可引起從普通非侵襲性疾病如咽炎、猩紅熱、膿皰病到侵襲性和嚴(yán)重侵襲性疾病如風(fēng)濕熱、鏈球菌感染性腎小球腎炎、壞死性筋膜炎、中毒休克綜合征等疾病的常見人類專性致病菌[1]。在鏈球菌

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本文編號(hào)：851955