本文關(guān)鍵詞：成年大鼠脊髓厚片自發(fā)熒光特異性消除新方法

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【摘要】：目的改良成年大鼠脊髓厚片自發(fā)熒光的特異性消除方法。方法利用染色前0.01 mol/L檸檬酸鈉緩沖液(pH=6.0)80℃水浴熱抗原修復(fù)45 min和染色后醋酸銨緩沖的0.01 mol/L硫酸銅溶液(p H=5.0)浸潤(rùn)的獨(dú)立或者聯(lián)合處理,特異性消除成年大鼠脊髓厚片漂片法免疫熒光染色中的自發(fā)熒光。結(jié)果染色前檸檬酸鈉酸性緩沖液水浴熱抗原修復(fù)能夠顯著消除成年大鼠脊髓厚片自發(fā)熒光。在此基礎(chǔ)上,染色后短時(shí)間醋酸銨緩沖的酸性硫酸銅溶液浸潤(rùn),即可完全消除這些自發(fā)熒光,并不減弱漂片法免疫熒光染色的目標(biāo)熒光信號(hào)。結(jié)論檸檬酸鈉酸性緩沖液水浴熱抗原修復(fù)-醋酸銨緩沖的酸性硫酸銅溶液浸潤(rùn)的聯(lián)合處理比較理想地特異性消除成年大鼠脊髓厚片漂片法免疫熒光染色中的自發(fā)熒光。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院組織胚胎學(xué)與神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 脊髓 厚組織切片 免疫熒光染色 自發(fā)熒光 寬場(chǎng)熒光顯微鏡
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31571240)
【分類號(hào)】：R361
【正文快照】： 成年嚙齒類動(dòng)物神經(jīng)組織中存在大量的內(nèi)源性熒光分子,常規(guī)組織處理(如醛類固定劑化學(xué)固定)也會(huì)帶來自發(fā)熒光產(chǎn)物。這些發(fā)射光譜范圍分布廣泛的自發(fā)熒光嚴(yán)重干擾神經(jīng)組織厚切片的漂片法免疫熒光染色中目標(biāo)熒光信號(hào)的觀察和定量分析[1-3]。目前的自發(fā)熒光消除方法缺乏有效性和特

【相似文獻(xiàn)】

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