本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及鑒定的相關(guān)研究

  更多相關(guān)文章： 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 生物學(xué)性狀 Hh信號通路

【摘要】：目的:原代培養(yǎng)并鑒定人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs),對h UCMSCs的生物學(xué)性狀、表面抗原、多向分化潛能等進(jìn)行研究,并初步檢測其內(nèi)源性Hedgehog(Hh)信號通路主要因子的RNA水平。方法:取足月健康剖宮產(chǎn)胎兒臍帶,提取h UCMSCs,貼壁培養(yǎng)。繪制生長曲線,檢測細(xì)胞周期。進(jìn)行體外成骨、成脂及成軟骨誘導(dǎo)。流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物。Real-time PCR檢測原代細(xì)胞內(nèi)源性Hh信號通路主要因子的m RNA水平。結(jié)果:臍帶剪碎經(jīng)膠原酶消化后24 h細(xì)胞即可貼壁,7 d可生長達(dá)培養(yǎng)皿底面積85%融合。P_3代h UCMSCs的生長曲線呈上升趨勢,傳代后第3 d進(jìn)入倍數(shù)生長期。并具有成骨分化、成脂分化及成軟骨分化的能力。流式細(xì)胞儀檢測99.04%的細(xì)胞高表達(dá)整合素分子CD29,98.80%的細(xì)胞高表達(dá)粘附分子CD44,85.09%的細(xì)胞高表達(dá)內(nèi)皮糖蛋白分子CD105,只有0.19%的細(xì)胞表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記物CD45,0.58%的細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮分子CD34。臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞內(nèi)能檢測到Hh信號通路中主要因子的內(nèi)源性表達(dá),其中Shh水平相對較高。結(jié)論:原代培養(yǎng)的h UCMSCs為進(jìn)一步探索Hh信號通路在顱頜骨缺損修復(fù)中的作用機(jī)制提供可靠的細(xì)胞來源。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院口腔醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 生物學(xué)性狀 Hh信號通路
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81400490) 湖北省自然科學(xué)基金(2014CFB388)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 頜骨及牙槽骨缺損修復(fù)時新骨形成的質(zhì)量、速度和長期穩(wěn)定性直接關(guān)系到口腔修復(fù)體的設(shè)計(jì)及預(yù)后[1]。在顱頜面骨缺損再生的臨床及基礎(chǔ)研究中,具有多向分化潛能的間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能分化為成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞,成為骨再生研究的主要種子細(xì)胞[2-6]。迄今

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本文編號：806355