本文關(guān)鍵詞：miR-1247-5p對Smad2基因的靶向調(diào)控作用

  更多相關(guān)文章： miR--p TGF-β信號(hào)通路 Smad基因 腫瘤

【摘要】：目的利用miR-1247-5p過表達(dá)模擬物mimics,研究miR-1247-5p對TGF-β信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白Smad2的靶向調(diào)控作用。方法合成模擬miR-1247-5p過表達(dá)的模擬物mimics,及抑制miR-1247-5p表達(dá)的抑制物inhibitors;同時(shí)構(gòu)建與miR-1247-5p互補(bǔ)靶基因Smad2的3'非翻譯區(qū),將其克隆到線性化的Report熒光報(bào)告載體中。將測序鑒定陽性的report-Smad2 3'-UTR重組質(zhì)粒,與miR-1247-5p的mimics/inhibitors共轉(zhuǎn)染至HEK-293T細(xì)胞,通過relative luciferase activity實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證靶向關(guān)系,并通過Western blot實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步檢測Smad2蛋白表達(dá)水平。結(jié)果成功構(gòu)建report-Smad2 3'-UTR重組質(zhì)粒,Western blot實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)染miR-1247-5p mimics組中Smad2蛋白表達(dá)下調(diào)(P0.05);而轉(zhuǎn)染miR-1247-5p inhibitors組中,Smad2蛋白表達(dá)上調(diào)(P0.05)。結(jié)論證實(shí)miR-1247-5p直接靶向TGF-β信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白Smad2的表達(dá),在蛋白水平對其進(jìn)行調(diào)控,為進(jìn)一步研究miRNA在細(xì)胞通路中的調(diào)控作用提供了依據(jù)。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院;西安市中心血站;寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： miR--p TGF-β信號(hào)通路 Smad基因 腫瘤
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81460368) 寧夏科技支撐項(xiàng)目[寧科計(jì)字(2013)20號(hào)] 寧夏自然科學(xué)基金(NZ-13149)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： microRNA(miRNA)是一類存在于真核生物,長度為18~25 nt的內(nèi)源性小分子RNA,通過與靶基因mRNA 3'端特定序列結(jié)合,從而降解目標(biāo)mRNA或?qū)ζ溥M(jìn)行轉(zhuǎn)錄抑制[1]。近年來研究發(fā)現(xiàn),miRNA可分布在肥大細(xì)胞、DC和巨噬細(xì)胞的分泌物中,參與細(xì)胞間多個(gè)信號(hào)傳導(dǎo)[2]。miRNA通過靶向作用于數(shù)個(gè)基

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1 梁佳玉;王玉美;方佳;楊雁;;轉(zhuǎn)化生長因子-β_1對大鼠肌成纖維細(xì)胞增殖及胞內(nèi)Smad蛋白磷酸化的影響[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年05期

2 Giuliana Zanninelli;Antonella Vetuschi;Roberta Sferra;Angela D'Angelo;Amato Fratticci;Maria Adelaide Continenza;Maria Chiaramonte;Eugenio Gaudio;Renzo Caprilli;Giovanni Latella;;Smad3 knock-out mice as a useful model to study intestinal fibrogenesis[J];World Journal of Gastroenterology;2006年08期

3 衛(wèi)曉紅;祁麗花;徐健;遲曉春;董靜霞;;卵泡刺激素調(diào)節(jié)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞中Smad2/Smad3蛋白的表達(dá)及磷酸化[J];解剖學(xué)雜志;2008年02期

4 蘇麗婷;夏時(shí)海;;Smad蛋白在轉(zhuǎn)化生長因子-β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的作用與機(jī)制[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2008年04期

5 曾惠芬;王慶文;;轉(zhuǎn)化生長因子-β及其Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展[J];中國藥物與臨床;2010年10期

6 劉瑛;林丁;;條件性Smad4基因敲除鼠模型的建立和鑒定及初步表型[J];國際眼科雜志;2014年01期

7 陳琛;葉冬梅;邵淑娟;;轉(zhuǎn)化生長因子-β/Smad信號(hào)通路研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志;2006年02期

8 林在俊;肖建如;羅劍;黃權(quán);周振華;陳素;楊興海;吳志鵬;;大鼠Smad6慢病毒干擾載體的構(gòu)建與鑒定[J];國際骨科學(xué)雜志;2011年06期

9 吳建新,孟祥軍,陳源文,程計(jì)林,李定國,陸漢明;Smad 7與轉(zhuǎn)化生長因子β_1受體后信息調(diào)控[J];中華肝臟病雜志;2003年05期

10 蘭雨;譚曉紅;翁土軍;劉兵;楊曉;;剔除成骨細(xì)胞特異性基因Smad4不影響小鼠造血穩(wěn)態(tài)的維持[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2008年01期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Bensoussan D.;Stoltz J.F.;de Isla N;;Differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells induced by biaxial tension involves Smad3 activation[A];中國生理學(xué)會(huì)第23屆全國會(huì)員代表大會(huì)暨生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要文集[C];2010年

2 ;Essential Role of Smad4 in Maintaining Cardiomyocyte Proliferation during Murine Embryonic Heart Development[A];中國遺傳學(xué)會(huì)“發(fā)育、遺傳和疾病”研討會(huì)論文匯編集[C];2007年

3 Kai Zhao;Haojun Xiong;Shan Chen;Fengtian He;;LXR suppresses Smad3 and plays anti-fibrotic role in renal cells[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告五[C];2014年

4 胡靜;張遠(yuǎn)強(qiáng);劉新平;許若軍;;Smad4蛋白在生后不同齡大鼠睪丸的表達(dá)與發(fā)育變化研究[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會(huì)2002年年會(huì)文摘匯編[C];2002年

5 張東山;劉伏友;陳香美;彭佑銘;;抑制Smad3的pSUPERRNAi系統(tǒng)的構(gòu)建和活性鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

6 崔玉芳;姜竺君;毛春明;靳巍;呂亞歆;杜雪梅;徐菡;楊曉;孫啟鴻;;Smad 3基因剔除對小鼠免疫功能影響的初步分析[A];第七屆全軍防原醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第五屆中國毒理學(xué)會(huì)放射毒理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

7 孫巖松;楊秀蘭;李慕;江其輝;尚士臣;時(shí)彥勝;蘇玉虹;李文龍;;Smad2基因敲除小鼠冷凍胚胎的研究[A];中國遺傳學(xué)會(huì)“發(fā)育、遺傳和疾病”研討會(huì)論文匯編集[C];2007年

8 熊杰;衛(wèi)偉;馬兵;夏照帆;李勤;余文林;程飚;;TGF-β1/Smad3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對皮膚成纖維細(xì)胞調(diào)控作用的研究[A];第七屆中國醫(yī)師協(xié)會(huì)美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文集[C];2010年

9 酈佳慧;呂開陽;李恒宇;夏照帆;;LPS誘導(dǎo)的肝臟急性期反應(yīng)在Smad3基因敲除小鼠中被抑制[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

10 徐國萍;陳琦;許祖德;;Smad7對TGFβ1誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

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1 張雪瑩;Smad4的條件性缺失對T細(xì)胞活化的影響[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

2 焦麗燕;熒光差示凝膠電泳技術(shù)的建立及其在角質(zhì)細(xì)胞特異性Smad4剔除小鼠表皮差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的應(yīng)用[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

3 周靜;人類Smad7的N端結(jié)構(gòu)域（NTD）蛋白質(zhì)的折疊性質(zhì)研究[D];上海交通大學(xué);2011年

4 孫勇;聯(lián)合培養(yǎng)體系中hUVECs對hBMSCs Runx2，，Smad-1基因表達(dá)及成骨作用的影響[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年

5 張鵬;平滑肌細(xì)胞特異性Smad4基因敲除小鼠的建立[D];蘭州大學(xué);2010年

6 蔣易楠;GATA2與Smad4相互作用對TGFβ信號(hào)通路負(fù)調(diào)控的初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

7 曾強(qiáng)林;抑制TGF-β1對慢性環(huán)孢素腎病小鼠Smad2/3及ILK信號(hào)分子的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

8 何欣蓉;TGF-β激活ERK通路的機(jī)制探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

9 丁祥云;Bmp4/Smad信號(hào)通路在小鼠原始卵泡發(fā)育中的作用及作用機(jī)制[D];山東大學(xué);2013年

10 余欣欣;苯甲酸雌二醇對去卵巢大鼠皮膚中TGFβ 1/Smad3信號(hào)通路的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

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