本文關(guān)鍵詞：人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)及鑒定

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【摘要】：目的探索人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)的無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)方法,并對(duì)此方法培養(yǎng)的i PSCs進(jìn)行鑒定。方法將人i PSCs接種于玻璃粘連蛋白(Vitronectin XF)包被的培養(yǎng)皿上培養(yǎng),采用EDTA消化傳代。倒置顯微鏡下觀察i PSCs的生長(zhǎng)狀態(tài);堿性磷酸酶(ALP)染色鑒定;采用PCR和免疫熒光檢測(cè)i PSCs多能性基因SSEA-1、Nanog、Sox2的表達(dá)情況。結(jié)果倒置顯微鏡下可見(jiàn)i PSCs呈典型的克隆狀生長(zhǎng),克隆呈圓形或橢圓形,邊界清晰、整齊;ALP染色結(jié)果陽(yáng)性;PCR結(jié)果顯示人i PSCs強(qiáng)表達(dá)多能性基因SSEA-1、Nanog、Sox2;免疫熒光結(jié)果顯示多能干細(xì)胞特異性指標(biāo)SSEA-1、Nanog、Sox2均呈陽(yáng)性。結(jié)論無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系培養(yǎng)人i PSCs,細(xì)胞能穩(wěn)定增殖,保持自我更新潛能及多能性。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 多能干細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 無(wú)飼養(yǎng)層
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81271347)
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 人誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(induced pluripotent stemcells,i PSCs)是一種借助重編程技術(shù)獲得的多能干細(xì)胞[1,2],不僅具有類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞(embryonicstem cell,ESC)的增殖能力和多能性[3],可被誘導(dǎo)分化為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等[4-6],而且還規(guī)避了ESC及成體干細(xì)胞面

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本文編號(hào)：780826