本文關鍵詞：人誘導性多能干細胞的無飼養(yǎng)層培養(yǎng)及鑒定

  更多相關文章： 多能干細胞 細胞培養(yǎng)技術 無飼養(yǎng)層

【摘要】：目的探索人誘導性多能干細胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)的無飼養(yǎng)層培養(yǎng)方法,并對此方法培養(yǎng)的i PSCs進行鑒定。方法將人i PSCs接種于玻璃粘連蛋白(Vitronectin XF)包被的培養(yǎng)皿上培養(yǎng),采用EDTA消化傳代。倒置顯微鏡下觀察i PSCs的生長狀態(tài);堿性磷酸酶(ALP)染色鑒定;采用PCR和免疫熒光檢測i PSCs多能性基因SSEA-1、Nanog、Sox2的表達情況。結果倒置顯微鏡下可見i PSCs呈典型的克隆狀生長,克隆呈圓形或橢圓形,邊界清晰、整齊;ALP染色結果陽性;PCR結果顯示人i PSCs強表達多能性基因SSEA-1、Nanog、Sox2;免疫熒光結果顯示多能干細胞特異性指標SSEA-1、Nanog、Sox2均呈陽性。結論無飼養(yǎng)層培養(yǎng)體系培養(yǎng)人i PSCs,細胞能穩(wěn)定增殖,保持自我更新潛能及多能性。
【作者單位】： 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院骨科;
【關鍵詞】： 多能干細胞 細胞培養(yǎng)技術 無飼養(yǎng)層
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81271347)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 人誘導性多能干細胞(induced pluripotent stemcells,i PSCs)是一種借助重編程技術獲得的多能干細胞[1,2],不僅具有類似于胚胎干細胞(embryonicstem cell,ESC)的增殖能力和多能性[3],可被誘導分化為運動神經(jīng)元、少突膠質細胞、心肌細胞等[4-6],而且還規(guī)避了ESC及成體干細胞面

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本文編號：780826