發(fā)布時(shí)間：2017-08-26 05:28

  本文關(guān)鍵詞：抗PSMA膜外域單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 前列腺特異性膜抗原(PSMA) 單克隆抗體 前列腺癌

【摘要】：目的:制備抗PSMA膜外域單克隆抗體。方法:應(yīng)用生物信息技術(shù)預(yù)測(cè)PSMA膜外域多肽抗原片段,原核表達(dá),免疫BALB/c小鼠,通過(guò)雜交瘤技術(shù)制備抗PSMA膜外域單克隆抗體,親和層析純化和Western blot及ELISA鑒定,并用于前列腺癌動(dòng)物模型放射免疫顯像。結(jié)果:經(jīng)軟件分析,獲得含310aa序列特異性強(qiáng)的膜外域抗原片段,免疫、融合后,經(jīng)過(guò)ELISA篩選獲得到3株陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞株(5E6、4A5和4D7),亞型鑒定結(jié)果為5E6、4A5為Ig G2a,4D7為Ig G1,腹水型抗體效價(jià)均在1∶256 000以上;Western blot結(jié)果表明,所制備的單克隆抗體均可與PSMA膜外域抗原特異性結(jié)合,競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA試驗(yàn)顯示制備的單抗與重組抗原及標(biāo)準(zhǔn)抗原PSMA能競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。動(dòng)物模型放射免疫顯像結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),制備的單克隆抗體在動(dòng)物體內(nèi)能與PSMA膜外域抗原特異性結(jié)合,并使腫瘤顯像。結(jié)論:制備的抗PSMA膜外域單克隆抗體能特異性識(shí)別PSMA抗原,為前列腺癌的免疫診斷及免疫治療奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 上海市中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 前列腺特異性膜抗原(PSMA) 單克隆抗體 前列腺癌
【基金】：上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院院級(jí)課題(No.2013GQ014Ⅱ)
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： 1本文為上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院院級(jí)課題(No.2013GQ014Ⅱ)。前列腺特異性膜抗原(Prostate specific membrane antigen,PSMA)是前列腺上皮細(xì)胞膜的一種Ⅱ型跨膜糖蛋白,共750個(gè)氨基酸殘基,由三個(gè)結(jié)構(gòu)域組成,分別是含19個(gè)氨基酸的胞內(nèi)域,含24個(gè)氨基酸的跨膜域和含707個(gè)氨基酸

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本文編號(hào)：739947