補(bǔ)肺清瘀顆粒對(duì)硬皮病模型小鼠肺及皮膚組織中Smad2、Smad3、Smad7、CTGF表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:觀察補(bǔ)肺清瘀顆粒對(duì)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的硬皮病模型鼠肺及皮膚組織纖維化程度及其中Smad2、Smad3、Smad7、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective tissue growth factor, CTGF)表達(dá)的影響,為從肺論治硬皮病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:60只雌性BALB/c小鼠(8周齡)隨機(jī)均分為空白對(duì)照組、模型組、補(bǔ)肺清瘀顆粒小、中、大劑量組。補(bǔ)肺清瘀顆粒三個(gè)劑量組及模型組采取每日1次背部皮內(nèi)注射博來(lái)霉素的方法制備硬皮病動(dòng)物模型,空白對(duì)照組以生理鹽水作背部皮內(nèi)注射。補(bǔ)肺清瘀顆粒三個(gè)劑量組于造模當(dāng)日開始分別以小、中、大劑量給藥,空白對(duì)照組及模型組均予清水。28天后處死小鼠,留取雙肺及皮膚組織,采用熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)技術(shù),測(cè)定各組小鼠肺及皮膚組織中Smad2、Smad3、Smad7、 CTGF mRNA和蛋白表達(dá)量。結(jié)果:1.與空白組相比,模型組皮膚和肺組織出現(xiàn)明顯纖維化,補(bǔ)肺清淤顆粒中、大劑量組亦出現(xiàn)纖維化,程度較模型組輕。2.與模型組相比,補(bǔ)肺清瘀顆粒中、大劑量均可降低皮膚和肺組織中Smad2、CTGF蛋白的表達(dá)量,尤以大劑量效果明顯(**P0.01),Smad3、 Smad7無(wú)明顯影響。3.與模型組相比,補(bǔ)肺清瘀顆粒中、大劑量均可降低皮膚和肺組織中Smad2、CTGF mRNA的表達(dá)量,尤以大劑量效果明顯(**P0.01),Smad3、Smad7無(wú)明顯影響。結(jié)論:補(bǔ)肺清瘀顆粒能夠抑制BLM誘導(dǎo)的硬皮病模型小鼠肺及皮膚組織中Smad2、和CTGF mRNA和蛋白的異常高表達(dá),不能抑制Smad3 mRNA和蛋白的高表達(dá),同時(shí)對(duì)抑制性Smad Smad7無(wú)明顯激發(fā)作用,推測(cè)其可能通過(guò)抑制Smad2,調(diào)控CTGF的表達(dá),進(jìn)而改善纖維化后的病理?yè)p傷,阻止皮膚和器官纖維化進(jìn)展。
【關(guān)鍵詞】:硬皮病 補(bǔ)肺清瘀顆粒 Smad2 Smad3 Smad7 CTGF
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R285.5;R-332
【目錄】:
- 摘要7-8
- Abstract8-9
- 前言9-11
- 第一部分 理論研究11-20
- 1 中醫(yī)理論研究11-17
- 1.1 古代文獻(xiàn)對(duì)硬皮病的認(rèn)識(shí)11-12
- 1.2 硬皮病的中醫(yī)治療進(jìn)展12-17
- 2 西醫(yī)理論研究17-20
- 2.1 Smad家族、CTGF的生物學(xué)特性18
- 2.2 Smad家族、CTGF在硬皮病發(fā)生中的作用機(jī)制18-19
- 2.3 抗Smad家族、CTGF的硬皮病治療進(jìn)展19-20
- 第二部分 實(shí)驗(yàn)研究20-28
- 1 實(shí)驗(yàn)材料20-21
- 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
- 1.2 動(dòng)物飼料20
- 1.3 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑20
- 1.4 主要儀器和設(shè)備20-21
- 2 實(shí)驗(yàn)方法21-23
- 2.1 動(dòng)物飼養(yǎng)21
- 2.2 模型制備21
- 2.3 分組及給藥21
- 2.4 標(biāo)本采集及處理21
- 2.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法21-23
- 3 統(tǒng)計(jì)方法23
- 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-28
- 4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況23-24
- 4.2 小鼠肺和皮膚組織的外觀及病理表現(xiàn)24
- 4.3 小鼠肺組織中Smad2、Smad3、Smad7、CTGF的表達(dá)24-25
- 4.4 小鼠皮膚組織中Smad2、Smad3、Smad7、CTGF的表達(dá)25-26
- 4.5 小鼠肺組織中Smad2、Smad3、Smad7、CTGF mRNA的表達(dá)26
- 4.6 小鼠皮膚組織中Smad2、Smad3、Smad7、CTGFmRNA的表達(dá)26-28
- 第三部分 討論28-34
- 1 補(bǔ)肺清瘀顆粒的立法依據(jù)28-30
- 1.1 溯源求本、病位在肺28-29
- 1.2 肺氣虧虛為本,瘀血阻絡(luò)為標(biāo)29-30
- 2 補(bǔ)肺清瘀顆粒的有效性評(píng)價(jià)30-32
- 2.1 模型選擇與模型評(píng)價(jià)30-31
- 2.2 補(bǔ)肺清瘀顆粒對(duì)Smad2、Smad3、Smad7及CTGF表達(dá)的影響31-32
- 3 本研究的不足之處32
- 3.1 造模方法選擇32
- 3.2 檢測(cè)方法的選擇32
- 3.3 檢測(cè)指標(biāo)的選擇32
- 4 進(jìn)一步研究思路32-34
- 參考文獻(xiàn)34-37
- 附錄37-39
- 附錄1 病理圖片37-38
- 附錄2 縮略語(yǔ)表38-39
- 致謝39
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):739110
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