本文關(guān)鍵詞：惡性瘧原蟲3D7株AP核酸內(nèi)切酶的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備

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【摘要】：為研究惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)3D7株AP核酸內(nèi)切酶(AP endonuclease)的功能,通過PCR的方法擴(kuò)增PF3D7_0305600(292~1 137 bp),構(gòu)建克隆載體。測序正確后,將該片段插入到pET-28a和p GEX-4T-1,構(gòu)建重組表達(dá)載體p ET-28a-Ae、p GEX-4T-1-Ae。將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入BL21-Codon Plus表達(dá)重組蛋白r-Ae-His和r-Ae-GST,經(jīng)SDS-PAGE和Western blot鑒定,r-Ae-His免疫家兔制備多克隆抗體,并用ELISA檢測抗血清效價,Western blot檢測抗體特異性。結(jié)果表明:表達(dá)的r-Ae-His分子量約為39 ku,r-Ae-GST分子量約為60 ku。制備的多克隆抗體能夠特異性地識別天然蛋白,可用于惡性瘧原蟲3D7株AP核酸內(nèi)切酶的后續(xù)研究。
【作者單位】： 吉林大學(xué)人獸共患病研究所;
【關(guān)鍵詞】： 惡性瘧原蟲 AP核酸內(nèi)切酶 基因克隆 多克隆抗體 藥物靶點(diǎn)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81130033)
【分類號】：R382.31
【正文快照】： 瘧原蟲(Plasmodium)是一類營寄生生活的單細(xì)胞原蟲,是瘧疾的病原體。世界范圍內(nèi),瘧疾依然是危害人類健康的重大公共衛(wèi)生問題,每年造成約70萬人死亡[1]。引起人體瘧疾的5種瘧原蟲中,以惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)造成的危害最為嚴(yán)重[2]。藥物治療作為控制瘧疾的重要手段，

本文編號：683175