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胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖和神經(jīng)分化的影響

發(fā)布時間:2017-08-12 21:12

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【摘要】:目的探究胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)對骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)增殖和神經(jīng)分化的影響。方法通過全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)BMSCs,免疫熒光檢測IGFBP4在P1、P4、P6、P8和P10 BMSCs的表達。取第4代BMSC細胞,分為單純培養(yǎng)基組和添加IGFBP4組,用CCK8試劑盒檢測單純培養(yǎng)基組和添加IGFBP 4組吸光度值A(chǔ)450 nm。再將BMSC細胞分為3組:neurocult組、EGF+b FGF組、EGF+b FGF+IGFBP4組,每組連續(xù)測定7 d,每天6個平行孔,誘導(dǎo)培養(yǎng)基Neuro Cult培養(yǎng)再分別添加EGF+b FGF和EGF+b FGF+IGFBP4,誘導(dǎo)其向神經(jīng)祖細胞分化,免疫熒光染色檢測Nestin和Sox-2表達,并觀察神經(jīng)球數(shù)量和細胞增殖活性。結(jié)果成功獲得原代大鼠BMSCs,可見CD105、CD44和CD90表達,IGFBP4的表達隨培養(yǎng)代數(shù)而增加,外源IGFBP4能明顯抑制BMSCs的增殖(P0.05)。經(jīng)誘導(dǎo)BMSCs形成的神經(jīng)球樣結(jié)構(gòu)表達Nestin和Sox-2,細胞增殖活性升高(P0.05)。結(jié)論 IGFBP4能抑制BMSCs的增殖,促進其向神經(jīng)祖細胞分化。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學院神經(jīng)生物學系北京市神經(jīng)再生修復(fù)研究重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白- 骨髓間充質(zhì)干細胞 神經(jīng)分化
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4(insulin likegrowth factor binding protein-4,IGFBP4)在多種腦細胞中表達,通過胰島素樣生長因子(insulin likegrowth factor,IGF)的信號通路[1]或不依賴于IGF的機制[2]調(diào)控調(diào)節(jié)多種細胞的增殖和分化過程。骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchy

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本文編號:663640

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