發(fā)布時間：2017-08-10 16:11

  本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓樹突狀細胞對白念珠菌吞噬、殺傷作用的研究

  更多相關(guān)文章： 骨髓 樹突狀細胞 白念珠菌 吞噬 殺傷

【摘要】：目的體外分離培養(yǎng)小鼠骨髓樹突狀細胞(Dendritic Cell,DC)并與白念珠菌共同孵育,研究不同濃度的DC對白念珠菌的吞噬、殺傷作用,并研究隨著共孵育時間的延長DC表型的變化及其吞噬、殺傷白念珠菌能力的變化。方法無菌條件下分離培養(yǎng)C57小鼠骨髓DC;倒置顯微鏡下觀察DC的形態(tài);Cellometer Mini細胞計數(shù)儀測定DC生長曲線及細胞直徑變化;流式細胞儀檢測DC及白念珠菌刺激后DC表面標志物CD11c及其表面分子MHCⅡ、CD40、CD80及CD86的表達;光學(xué)顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡及流式細胞儀測定DC對白念珠菌的吞噬及殺傷作用。結(jié)果體外培養(yǎng)10d小鼠骨髓DC,倒置顯微鏡觀察可見典型DC形態(tài);隨著培養(yǎng)時間的延長,細胞逐漸增大,培養(yǎng)第10天時,細胞直徑分布最多的為10.2μm;生長曲線顯示,DC呈倍數(shù)增長,第2~9天為細胞對數(shù)生長期,第9天左右增殖曲線達到頂峰。培養(yǎng)第10天,未經(jīng)白念珠菌刺激的DC表面CD11c分子及CD80分子高水平表達,CD40、CD86及MHCⅡ低表達;經(jīng)白念珠菌刺激后,DC表面CD11c分子、CD80、CD40、CD86及MHCⅡ均高表達,呈成熟DC表型。激光共聚焦(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)及流式細胞儀(Flow Cytometer,FCM)檢測DC對白念珠菌吞噬作用,當DC與白念珠菌的比例為1∶1時,隨著共培養(yǎng)時間的延長(30min~1.5h),吞噬率無明顯變化(P=0.063);當DC與白念珠菌比例為2∶1、1∶2及1∶4,隨著DC細胞所占比例的減小,DC細胞吞噬作用增強,當比例為1∶4時,DC吞噬作用最強,且隨著共培養(yǎng)時間的延長(30min~1.5h),吞噬率也明顯上升,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003;P=0.002;P=0.002)。顯微鏡檢測DC對白念珠菌殺傷率,可見隨著時間的延長,各實驗組的殺傷率下降(P=0.000);當DC∶白念珠菌=1∶1時,較2∶1時,殺傷率明顯下降,但隨著白念珠菌比例在一定范圍內(nèi)的增高(從1∶1到1∶4),殺傷率明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。結(jié)論小鼠骨髓細胞體外經(jīng)GM-CSF誘導(dǎo)可培養(yǎng)DC具有較高的純度,呈未成熟細胞表型;且每只C57小鼠可獲得3×107總數(shù)的細胞,可滿足一些實驗的DC用量。經(jīng)白念珠菌刺激后DC表型成熟;在一定的比率范圍內(nèi),DC對白念珠菌有較強的吞噬及殺傷作用,其吞噬作用隨著DC與白念珠菌比例的減小而增強。且隨著兩者作用時間的延長,DC對白念珠菌的吞噬作用逐漸增強而殺傷作用逐漸減弱。
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院皮膚病研究所;濟寧市第一人民醫(yī)院皮膚科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 樹突狀細胞 白念珠菌 吞噬 殺傷
【基金】：973計劃項目(2013CB531605) 國家自然科學(xué)基金(81401653) 山東省自然科學(xué)基金(ZR2015HL127) 濟寧市醫(yī)學(xué)科學(xué)計劃(2014jnnk13)
【分類號】：R379.4
【正文快照】： Confocal Microscope(LSCM)and flow cytometry.Results Typical morphology of DC cells was observed under inverted mi-croscope 10days after culture.10.2μm was the most widely distributed diameter of DC as illustrated and the size of DC in-creased with the e

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1 劉為國;黃敏;;白念珠菌粘附上皮細胞的機制[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2002年02期

2 馮文莉;王艷青;奚志琴;楊靜;張潤梅;冀英;吳媛;賈曉強;;非白念珠菌和白念珠菌感染危險因素的對比研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年17期

3 譚宏月;陳麗華;皇幼明;鐘彬;顧軍;溫海;;白念珠菌基因敲除技術(shù)的研究進展[J];中國真菌學(xué)雜志;2012年06期

4 趙敬軍;;白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的研究近況[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2000年02期

5 牛云彤,李少平;白念珠菌毒力因子研究進展[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2000年01期

6 王魯,刁慶春,蔣戈,劉榮卿,鐘白玉;白念珠菌保護性單抗的研究[J];中華皮膚科雜志;2001年05期

7 邵先安;;淋巴細胞對白念珠菌的粘附[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2002年04期

8 張軍民,王漢平,魯長明,席麗艷,曾凡欽;白念珠菌基因微衛(wèi)星多態(tài)性與分型探討[J];中國麻風皮膚病雜志;2002年01期

9 苑天紅,王明永,吳升偉,吳承龍;小鼠腹腔吞噬細胞對二相性白念珠菌的吞噬研究[J];貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年04期

10 苑天紅,王明永,吳升偉,吳承龍;甘露糖在介導(dǎo)二相性白念珠菌粘附中的重要作用[J];中國人獸共患病雜志;2004年11期

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1 王冬云;譚升順;馬慧群;馬韻琴;陳慶秀;;白念珠菌的毒力研究——分泌性酸性蛋白酶活力的測定[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 滿旭;王惠平;;白念珠菌轉(zhuǎn)錄因子編碼基因表達與氟康唑耐藥的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會第十八次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2012年

3 黃廣華;;白念珠菌有性生殖、形態(tài)發(fā)生及毒性的進化[A];中國菌物學(xué)會第五屆會員代表大會暨2011年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

4 王慧;徐寧;喻其林;程欣欣;邢來君;李明春;;鈣細胞存活途徑與白念珠菌的致病性[A];中國菌物學(xué)會第五屆會員代表大會暨2011年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2011年

5 郭仁勇;;白念珠菌聚苯乙烯黏附增強基因1的研究進展[A];2008年浙江省檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

6 ;線粒體功能在不同環(huán)境對白念珠菌生存及代謝的影響[A];2012年中國菌物學(xué)會學(xué)術(shù)年會會議摘要[C];2012年

7 周萬青;沈瀚;張之烽;張葵;;白念珠菌臨床分離調(diào)查及基因分型研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

8 景偉芳;王惠平;;白念珠菌對唑類藥物耐藥機制的研究進展[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

9 陳雪蓉;;白念珠菌毒力因子的研究進展[A];湖北省性學(xué)會第二屆第二次學(xué)術(shù)年會論文集[C];2005年

10 黃元蘭;胡志德;孫懿;鄧安梅;;顆粒溶素對白念珠菌感染宿主能力的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第九次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

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1 潘搏;白念珠菌甘露多糖疫苗評價及白念珠菌侵入人內(nèi)皮和上皮細胞動態(tài)觀察[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 劉澤虎;白念珠菌形態(tài)、胞壁多糖的結(jié)構(gòu)及其免疫學(xué)活性的相關(guān)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

3 唐寧楓;白念珠菌烯醇化酶的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

4 王樂;小鼠口腔陰道雙部位白念珠菌感染模型的構(gòu)建及不同部位來源白念珠菌的毒力差異研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

5 徐錚;白念珠菌基因芯片的制備和應(yīng)用及兩個新基因的克隆和功能鑒定[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

6 李岷;念珠菌胞壁葡聚糖某些結(jié)構(gòu)、活性及分類鑒定意義的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1999年

7 廖俊;1.β-[1,2]-寡聚甘露糖肽化合物的合成及白念珠菌疫苗的免疫活性研究2.新型氮唑類化合物的合成及抗真菌活性研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 曹穎瑛;白念珠菌生物被膜形成相關(guān)基因的功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

9 杜m[;白念珠菌Ofi1及鐵離子滲透酶的功能研究[D];西南大學(xué);2015年

10 賈健輝;白念珠菌IPF7817基因的生物學(xué)功能研究[D];沈陽藥科大學(xué);2007年

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1 張冰;白念珠菌Sac1蛋白的鑒定及其功能的研究[D];南開大學(xué);2015年

2 劉樂;不同培養(yǎng)條件對白念珠菌芽管形成的影響[D];蘭州大學(xué);2008年

3 閻瀾;白念珠菌耐藥株的蛋白質(zhì)組與基因表達譜分析及差異蛋白質(zhì)與差異基因的識別鑒定[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

4 秦曉峰;白念珠菌臨床株耐藥基因表達與氟康唑耐藥的關(guān)系[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年

5 鐘毅;白念珠菌蘋果酸脫氫酶的結(jié)構(gòu)及功能初步研究[D];中山大學(xué);2012年

6 張蕾;紫外線對白念珠菌生長的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

7 郭雅莉;白念珠菌多位點序列分型研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

8 滿旭;白念珠菌鋅簇轉(zhuǎn)錄因子編碼基因表達與氟康唑耐藥的關(guān)系[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

9 李蕾;白念珠菌天冬氨酸蛋白酶2真核表達載體的構(gòu)建及原核表達[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2009年

10 朱春香;逆轉(zhuǎn)座子激活對白念珠菌適應(yīng)性形成的調(diào)控作用及其機制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

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本文編號：651634