本文關(guān)鍵詞：全反式維甲酸調(diào)控BMP9誘導(dǎo)3T3-L1前脂肪細(xì)胞成骨和成脂分化

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【摘要】：目的研究全反式維甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)調(diào)控骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞成骨和成脂分化的作用及相關(guān)機(jī)制。方法首先用RTPCR檢測維甲酸受體在3T3-L1前脂肪細(xì)胞中的表達(dá);用BMP9編碼序列的重組腺病毒感染3T3-L1細(xì)胞,再以1μmol/L的ATRA干預(yù)不同時(shí)間后,利用堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性測定和染色、Western blot檢測骨橋素(osteopontin,OPN)、骨鈣素(osteocalcin,OC)和脂肪酸結(jié)合蛋白(adipocyte fatty acid binding protein,a P2)表達(dá),茜素紅染色檢測鈣鹽沉積水平,油紅O染色檢測脂質(zhì)積聚研究BMP9和ATRA對前脂肪細(xì)胞成骨和成脂分化的作用;利用熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒和Western blot檢測ATRA對BMP9介導(dǎo)的BMPR-Smad信號通路活性的影響。結(jié)果前脂肪細(xì)胞中,除視黃醇受體γ外其余5種維甲酸受體均有表達(dá);BMP9能增加前脂肪細(xì)胞ALP活性(P0.01),并促進(jìn)OPN及OC蛋白表達(dá)和鈣鹽沉積,ATRA能進(jìn)一步增強(qiáng)該作用(P0.01);BMP9能促進(jìn)前脂肪細(xì)胞中脂質(zhì)積聚,并誘導(dǎo)a P2表達(dá),但該作用被ATRA抑制;ATRA還能夠上調(diào)細(xì)胞中BMP9的mRNA和蛋白表達(dá),BMP9合并ATRA組的Samd1/5/8磷酸化水平明顯強(qiáng)于BMP9組,BMPR-Smad報(bào)告質(zhì)粒熒光素酶活性也呈相同變化趨勢(P0.01)。結(jié)論在前脂肪細(xì)胞中,ATRA能增強(qiáng)BMP9的成骨誘導(dǎo)活性,并抑制其誘導(dǎo)的成脂分化;ATRA的作用可能與進(jìn)一步激活BMP9介導(dǎo)的BMPR-Smad信號有關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 全反式維甲酸 BMPR-Smad信號 前脂肪細(xì)胞 細(xì)胞分化
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(81301573) 重慶市科委面上項(xiàng)目(CSTC2013jcyj A10090)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】：

【參考文獻(xiàn)】

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1 黃帆;劉映孜;楊秋s，

本文編號：640515