天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

乳酸桿菌對細胞因子及TLR-NF-κB途徑的調(diào)節(jié)作用研究

發(fā)布時間:2017-08-07 21:15

  本文關(guān)鍵詞:乳酸桿菌對細胞因子及TLR-NF-κB途徑的調(diào)節(jié)作用研究


  更多相關(guān)文章: 乳酸桿菌 細胞因子 TLR-NF-κB信號通路


【摘要】:乳酸菌作為益生菌,可以通過對抗炎因子和促炎因子的調(diào)節(jié)發(fā)揮抗腸炎作用,研究表明,不同乳酸菌對不同細胞因子的調(diào)節(jié)作用存在種屬性差異。近幾年,乳酸桿菌對致病菌S.sonnei刺激HT-29細胞產(chǎn)生細胞因子的調(diào)節(jié)作用及其作用機制的研究較少,所以本實驗以S.sonnei作為炎癥刺激,研究乳酸桿菌與HT-29細胞中TLR-NF-κB信號途徑的相關(guān)性。采用ELISA法研究副干酪乳桿菌副干酪亞種M5、干酪乳桿菌Q8和鼠李糖乳桿菌J10對HT-29產(chǎn)生的多種細胞因子白介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和IL-12等的調(diào)節(jié)作用。采用免疫熒光技術(shù)和流式細胞術(shù)研究了三種乳酸桿菌M5-L、Q8-L和J10-L對HT-29細胞中TLR-NF-κB信號通路的調(diào)節(jié)作用。實驗結(jié)果顯示,只加S.sonnei的陽性對照組中,IL-1β分泌量為156.3pg/m L,而M5-L、Q8-L和J10-L的預(yù)防組中,IL-1β的分泌量分別為118.9pg/m L、80.0 pg/m L和104.9 pg/m L,說明三種乳酸桿菌對炎性因子IL-1β均有顯著的抑制。IL-8的分泌量在只加S.sonnei的陽性對照組中,為1096.0pg/m L,而M5-L、Q8-L和J10-L的預(yù)防組中,IL-8的分泌量分別為112.7 pg/m L、290.9 pg/m L和213.0 pg/m L,說明三種乳酸桿菌對炎性因子IL-8的分泌均也有顯著的抑制。對TNF-α的檢測結(jié)果顯示,三種乳酸桿菌可以促進HT-29細胞中TNF-α的分泌,但分泌量較少。對IL-10的檢測結(jié)果顯示,M5-L和J10-L能顯著促進抗炎因子IL-10的分泌。對炎性因子IL-6和IL-12的檢測發(fā)現(xiàn),HT-29細胞本身不能產(chǎn)生IL-6和IL-12,且S.sonnei也不能刺激HT-29細胞產(chǎn)生這兩種炎性因子。用熒光定量PCR法,對IL-8的m RNA進行檢測,結(jié)果顯示M5-L、Q8-L和J10-L均能顯著降低IL-8的m RNA表達,表明三種乳酸桿菌不僅能抑制炎性因子IL-8的分泌,而且也能抑制其m RNA表達。免疫熒光技術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),致病菌S.sonnei能促進NF-κB發(fā)生核轉(zhuǎn)位,從而促進炎性因子IL-8的產(chǎn)生,三種乳酸桿菌對NF-κB的核轉(zhuǎn)位有一定的抑制作用,但不能完全抑制。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果表明,致病菌S.sonnei能刺激誘導(dǎo)HT-29細胞上TLR4表達的提高,三種乳酸桿菌均能抑制S.sonnei刺激導(dǎo)致的HT-29細胞上TLR4表達的提高,從而抑制TLR4介導(dǎo)的信號通路。
【關(guān)鍵詞】:乳酸桿菌 細胞因子 TLR-NF-κB信號通路
【學(xué)位授予單位】:哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R371
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • Abstract5-10
  • 第1章 緒論10-18
  • 1.1 課題研究背景及目的意義10-11
  • 1.2 乳酸菌菌體對腸道炎癥的調(diào)控作用研究11-12
  • 1.2.1 乳酸菌活菌體對腸道炎癥的調(diào)控作用11-12
  • 1.2.2 乳酸菌死菌體對腸道炎癥的調(diào)控作用12
  • 1.3 乳酸菌的胞外代謝物對腸道炎癥的調(diào)控作用研究12-14
  • 1.3.1 乳酸菌的胞外多肽對腸道炎癥的調(diào)控作用12-13
  • 1.3.2 乳酸菌的代謝物乳酸對腸道炎癥的調(diào)控作用13-14
  • 1.3.3 乳酸菌的活性產(chǎn)物—耐消化酶對腸道炎癥的調(diào)控作用14
  • 1.4 乳酸菌DNA對腸道炎癥的調(diào)控作用研究14-15
  • 1.5 乳酸菌表面成分對腸道炎癥的調(diào)控作用研究15-16
  • 1.5.1 乳酸菌多磷酸鹽對腸道炎癥的調(diào)控作用研究15
  • 1.5.2 乳酸菌S層蛋白對腸道炎癥的調(diào)控作用研究15-16
  • 1.6 本課題主要研究內(nèi)容16-18
  • 1.6.1 本課題的技術(shù)路線16
  • 1.6.2 本課題的研究內(nèi)容16-18
  • 第2章 材料和方法18-29
  • 2.1 材料及儀器18-21
  • 2.1.1 材料與試劑18-19
  • 2.1.2 實驗儀器19-20
  • 2.1.3 培養(yǎng)基20-21
  • 2.1.4 菌種和細胞21
  • 2.2 乳酸桿菌和致病菌的菌落計數(shù)21-22
  • 2.2.1 乳酸菌的菌落計數(shù)21-22
  • 2.2.2 致病菌的菌落計數(shù)22
  • 2.3 乳酸桿菌及致病菌S. sonnei對HT-29 細胞的干預(yù)處理22-23
  • 2.3.1 細胞處理22
  • 2.3.2 干預(yù)處理22-23
  • 2.4 NO試劑盒測HT-29 細胞上清液中NO含量23
  • 2.5 ELISA法檢測HT-29 細胞分泌的細胞因子含量23-24
  • 2.6 熒光定量PCR測定炎性因子IL-8 的m RNA表達量24-27
  • 2.7 TLR-NF-κB信號通路的檢測27-28
  • 2.7.1 免疫熒光法觀察NF-κB蛋白的核轉(zhuǎn)位27
  • 2.7.2 流式細胞術(shù)檢測HT-29 細胞上TLR4 的表達27-28
  • 2.8 數(shù)據(jù)處理及繪圖28-29
  • 第3章 乳酸桿菌對NO及IL-10 和TNF-α 調(diào)節(jié)作用研究29-39
  • 3.1 乳酸桿菌和致病菌的菌落計數(shù)29-30
  • 3.2 HT-29 細胞上清液中NO含量的變化30-32
  • 3.3 HT-29 細胞上清液中抗炎因子IL-10 含量的變化32-35
  • 3.4 HT-29 細胞上清液中細胞因子TNF-α 含量的變化35-38
  • 3.5 本章小結(jié)38-39
  • 第4章 乳酸桿菌對炎性因子的調(diào)節(jié)作用研究39-54
  • 4.1 乳酸桿菌對S. sonnei刺激HT-29 細胞分泌IL-1β 的調(diào)節(jié)39-42
  • 4.2 乳酸桿菌對S. sonnei刺激HT-29 細胞分泌IL-8 的調(diào)節(jié)42-45
  • 4.3 乳酸桿菌對炎性因子IL-6 和IL-12 的調(diào)節(jié)45-49
  • 4.4 乳酸桿菌對HT-29 細胞產(chǎn)生IL-8 的m RNA表達的調(diào)節(jié)49-52
  • 4.4.1 RNA質(zhì)量及引物特異性鑒定49-50
  • 4.4.2 乳酸桿菌對IL-8 的mRNA表達的調(diào)節(jié)50-52
  • 4.5 本章小結(jié)52-54
  • 第5章 乳酸桿菌對TLR-NF-κB信號通路的調(diào)節(jié)作用54-61
  • 5.1 乳酸桿菌對HT-29 細胞中NF-κB p65 核轉(zhuǎn)位的調(diào)節(jié)54-58
  • 5.2 乳酸桿菌對HT-29 細胞上TLR4 表達的調(diào)節(jié)58-60
  • 5.3 本章小結(jié)60-61
  • 結(jié)論61-62
  • 參考文獻62-69
  • 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文69-71
  • 致謝71

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳曦;歐陽欽;;HT-29細胞Toll通路相關(guān)分子表達與調(diào)控的研究[J];四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年04期

2 Sahar K Hegazy;Mohamed M El-Bedewy;;Effect of probiotics on pro-inflammatory cytokines and NF-κB activation in ulcerative colitis[J];World Journal of Gastroenterology;2010年33期

,

本文編號:636743

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/xiyixuelunwen/636743.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶80de4***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com