堿性成纖維細(xì)胞生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子-β1對表皮干細(xì)胞增殖和分化的作用
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【摘要】:目的觀察堿性成纖維細(xì)胞生長因子(b FGF)和轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)對體外培養(yǎng)的表皮干細(xì)胞(ESC)增殖和分化的作用。方法從10只1~3 d齡SD大鼠提取ESC,實驗選用第2代細(xì)胞。按隨機(jī)數(shù)字表法將細(xì)胞分為bFGF組、TGF-β1組、bFGF+SU5402組和TGF-β1+SB505124組和對照組,各干預(yù)組角質(zhì)形成細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中分別加入10 ng/mLbFGF、10 ng/mLTGF-β1、10 ng/mLbFGF+10μM-SU5402(bFGF受體抑制劑)、10 ng/mLTGF-β1+1 uM-SB505124(TGF-β1受體抑制劑),對照組不做處理,于處理后即刻、1、3、7、10 d 5個時間點顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài),以MTS法檢測各組ESC增殖情況,取各組處理后10 d細(xì)胞以Transwell法檢測遷移能力,并采用實時熒光定量RT-PCR法及免疫印跡法檢測各組基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型膠原的相對表達(dá)量。結(jié)果 bFGF組ESC較對照組增殖能力(t=6.65,P0.01)及遷移能力(t=7.50,P0.01)顯著增強(qiáng),MMP-1表達(dá)(t=12.90,P0.01)明顯增高,而α-SMA(t=-30.31,P0.01)、Ⅰ型膠原(t=-10.61,P0.01)和Ⅲ型膠原的表達(dá)量明顯偏低(t=-7.91,P0.01);TGF-β1組ESC與對照組相比增殖能力(t=-3.36,P0.05)及遷移能力(t=-3.96,P=0.01)顯著減弱,MMP-1表達(dá)(t=-8.81,P0.01)明顯減少,而α-SMA(t=15.92,P0.01)、Ⅰ型膠原(t=-16.47,P0.01)和Ⅲ型膠原(t=22.80,P0.01)的表達(dá)量較對照組明顯偏高;bFGF+SU5402組ESC增殖遷移能力及分化程度較對照組均無明顯差別(P0.05),而TGF-β1+SB505124組ESC遷移能力較對照組顯著增強(qiáng)(t=9.81,P0.01)。結(jié)論 bFGF可以顯著促進(jìn)ESC增殖和遷移,進(jìn)而減少Ⅰ、Ⅲ型膠原的形成;而TGF-β1在抑制ESC增殖及遷移,進(jìn)而促進(jìn)Ⅰ、Ⅲ型膠原的形成。
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院燒傷科;
【關(guān)鍵詞】: 堿性成纖維細(xì)胞生長因子 轉(zhuǎn)化生長因子-β 表皮干細(xì)胞 肌成纖維細(xì)胞 α-平滑肌肌動蛋白
【基金】:廣東省科技計劃資助項目(2014A020212055) 國家自然基金項目(81372062)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 皮膚組織的自我更新和損傷修復(fù)主要靠表皮干細(xì)胞(epidermal stem cell,ESC)的代償性增殖和定向分化來完成[1]。而ESC的增殖和分化主要受其所處的微環(huán)境又稱“干細(xì)胞龕盒”的調(diào)節(jié),其中細(xì)胞因子起關(guān)鍵作用[2]。堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和
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,本文編號:628852
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