發(fā)布時間：2017-08-04 04:14

  本文關(guān)鍵詞：miR-20b直接靶向3′-UTR負(fù)性調(diào)節(jié)VEGF的表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 血管內(nèi)皮生長因子 ′-非編碼區(qū) miR-b 雙熒光素酶報(bào)告載體

【摘要】：目的探討miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非編碼區(qū)(3′-UTR)而調(diào)控其表達(dá)。方法采用miRanda軟件預(yù)測VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的結(jié)合位點(diǎn);使用PCR方法擴(kuò)增RAW264.7細(xì)胞VEGF基因3′-UTR序列,經(jīng)雙酶切后克隆到pmiR-RB-Report~(TM)質(zhì)粒海腎熒光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR雙熒光素酶重組質(zhì)粒,使用電泳法和測序法進(jìn)行驗(yàn)證;將重組質(zhì)�；蚩召|(zhì)粒與miR-20b模擬物或其對照共轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞,24h后檢測相應(yīng)熒光素酶活性。結(jié)果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的結(jié)合位點(diǎn);獲得了含VEGF 3′-UTR的雙熒光素酶報(bào)告載體;重組質(zhì)粒與miR-20b模擬物共轉(zhuǎn)染組HeLa細(xì)胞的熒光素酶活性明顯低于空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建小鼠VEGF基因3′-UTR雙熒光素酶報(bào)告載體,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而負(fù)性調(diào)控其表達(dá)。
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;蚌埠醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室安徽省感染與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 血管內(nèi)皮生長因子 ′-非編碼區(qū) miR-b 雙熒光素酶報(bào)告載體
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81273273) 安徽省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.1308085MH114)
【分類號】：R363
【正文快照】： 血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)在生理性和病理性的血管生成中均起到重要作用,對于血管內(nèi)皮細(xì)胞來說,它是一種分泌性的有絲分裂原,是最具潛能的促血管生成因子[1]。VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F、PIGF-1和PIGF-12

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜彥艷;單保恩;;報(bào)告基因熒光素酶在科研中的應(yīng)用[J];中華腫瘤防治雜志;2009年09期

2 詹林盛,饒林,彭劍淳,王會中,賈帥爭,王全立;HCVIRES介導(dǎo)熒光素酶小鼠體內(nèi)表達(dá)模型的建立[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2004年03期

3 彭劍淳;高博;王怡;付秋霞;樊煒;周欠欠;賈帥爭;詹林盛;;雙熒光素酶標(biāo)記丙型肝炎病毒亞基因組復(fù)制子細(xì)胞模型的建立[J];軍事醫(yī)學(xué);2013年09期

4 黃仁魏,津田弘之,高月清,李銘權(quán),廖適生,梁錦華,吳祥元;紅細(xì)胞生成素介導(dǎo)的早期信號傳遞的研究[J];實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;1996年03期

5 王小紅,王升啟,管偉,毛秉智;HCV5′NCR轉(zhuǎn)基因細(xì)胞HepG2.9706的特性分析[J];病毒學(xué)報(bào);2002年01期

6 高曉寧;林季;李永輝;王莉莉;于力;;FLT3基因3′-非翻譯區(qū)-熒光素酶報(bào)告載體的構(gòu)建及其活性鑒定[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2010年03期

7 楊潔;李占亭;杜德偉;柴青煥;王麗;張惠中;孫脊峰;;缺氧調(diào)控報(bào)告載體的構(gòu)建與鑒定[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年07期

8 欒好江,鄧潔英,史軼蘩;垂體生長激素的調(diào)節(jié)激素對人B淋巴母細(xì)胞系IM-9中生長激素基因啟動子活性的影響[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2001年05期

9 ;英科學(xué)家首次測出活體心臟能量水平[J];生命世界;2006年11期

10 龐智,JulianRFWalters;維生素D_3對報(bào)告載體熒光素酶表達(dá)的作用[J];營養(yǎng)學(xué)報(bào);1999年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 梁紅茹;譚業(yè)平;頓燦;郭霄峰;;熒光素酶標(biāo)記狂犬病毒rHEP-luc株的生物學(xué)特性研究[A];2010全國狂犬病防控高層論壇論文集[C];2010年

2 陳靜;葉平;劉永學(xué);;亞油酸對1型纖溶酶原激活物抑制劑表達(dá)的影響及其機(jī)制[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 饒林;特異性靶向IRES的抗丙型肝炎病毒核酸藥物及影響IRES功能的因素研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

2 張靜;神經(jīng)元限制性沉默因子對CART基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用及其機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2011年

3 龔鳳英;細(xì)胞因子對垂體人生長激素基因表達(dá)的調(diào)節(jié)及其機(jī)理的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳德旺;雙親性分子傘的合成表征與穿膜研究[D];廈門大學(xué);2008年

，

本文編號：617687