發(fā)布時間：2017-07-26 01:10

  本文關(guān)鍵詞：清熱止血顆粒、雷公藤多苷對紫癜性腎炎足細(xì)胞損傷模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:通過觀察清熱止血顆粒、雷公藤多苷(GTW)等藥物對紫癜性腎炎(HSPN)腎小球足細(xì)胞損傷模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表達(dá)的影響,探討各藥物對紫癜性腎炎治療作用的機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)小鼠系膜細(xì)胞、小鼠足細(xì)胞,分離提純紫癜性腎炎患兒血清中的單體Ig A1(m Ig A1),熱聚合成熱聚合Ig A1(aggregated Ig A1,a Ig A1),用a Ig A1與小鼠系膜細(xì)胞共培養(yǎng)48小時(h)后留取培養(yǎng)液,再用其刺激腎小球足細(xì)胞,制造足細(xì)胞損傷模型,同時分別加入清熱止血顆粒、中藥制劑雷公藤多苷、以上兩種藥物聯(lián)合用藥、強(qiáng)的松聯(lián)合低分子肝素、空白含藥血清及胎牛血清,分別于刺激24h和48h后收集足細(xì)胞,分別通過Western Blot(WB)及免疫熒光(Immunofluorescence,IF)兩種方法測定足細(xì)胞相關(guān)蛋白表達(dá)量的變化。結(jié)果:一、分別干預(yù)24h、48h后,通過WB方法檢測足細(xì)胞Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白的表達(dá)量,結(jié)果顯示三個蛋白均為正常組最高,模型組最低,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義:(1)24h后足細(xì)胞Nephrin蛋白的表達(dá):GTW組、GTW+清熱止血顆粒組及強(qiáng)的松+低分子肝素組的Nephrin蛋白表達(dá)較模型組明顯升高,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,清熱止血顆粒組與模型組之間無統(tǒng)計學(xué)差異,GTW+清熱止血顆粒組、GTW組及強(qiáng)的松+低分子肝素組三組之間互相對比無統(tǒng)計學(xué)意義;48h后雷公藤多苷+清熱止血顆粒組較強(qiáng)的松+低分子肝素組蛋白量顯著升高,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。(2)24h后足細(xì)胞Podocin蛋白的表達(dá):GTW+清熱止血顆粒、強(qiáng)的松+低分子肝素組的蛋白量與模型組對比顯著升高,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,GTW組蛋白表達(dá)量較模型組增高,強(qiáng)的松+低分子肝素組較GTW組的表達(dá)顯著升高,但與GTW+清熱止血顆粒組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義,清熱止血顆粒組蛋白表達(dá)量與模型組無差異;48h后結(jié)果:強(qiáng)的松+低分子肝素組較GTW組蛋白表達(dá)增高明顯,但相對于GTW+清熱止血方組無統(tǒng)計學(xué)差異。(3)24h后足細(xì)胞Podocalyxin蛋白的表達(dá):GTW+清熱止血顆粒組蛋白表達(dá)較模型組增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,GTW組、強(qiáng)的松+低分子肝素組蛋白表達(dá)較模型組增高明顯,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,清熱止血顆粒組蛋白表達(dá)較模型組差異無統(tǒng)計學(xué)意義,強(qiáng)的松+低分子肝素組蛋白表達(dá)較GTW+清熱止血顆粒組增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義;48h后Podocalyxin蛋白的表達(dá)結(jié)果顯示:GTW組、GTW+清熱止血顆粒組、強(qiáng)的松+低分子肝素組蛋白表達(dá)較模型組增高明顯,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義,三組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。二、IF測定足細(xì)胞標(biāo)志蛋白Nephrin、Podocin、Podocalyxin的定位表達(dá)顯示:正常對照組Nephrin蛋白在足細(xì)胞胞漿表達(dá),Podocin蛋白在足細(xì)胞胞膜表達(dá),Podocalyxin蛋白在足細(xì)胞胞漿內(nèi)呈顆粒狀表達(dá);模型組Nephrin蛋白的表達(dá)明顯減弱、Podocin蛋白和Podocalyxin蛋白無表達(dá);各組藥物均能上調(diào)足細(xì)胞損傷模型上這三種蛋白的表達(dá)量。刺激48h與24h相比,細(xì)胞數(shù)量急劇下降,細(xì)胞形態(tài)不完整,部分細(xì)胞呈破絮狀。結(jié)論:1、GTW、GTW+清熱止血顆粒、強(qiáng)的松+低分子肝素均有修護(hù)損傷足細(xì)胞的作用。2、GTW+清熱止血顆粒對于足細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白Nephrin的修護(hù)作用可能比強(qiáng)的松+低分子肝素的效果好;強(qiáng)的松+低分子肝素在保護(hù)Podocin蛋白方面可能優(yōu)于單用GTW,GTW+清熱止血顆�？善鸬絽f(xié)同作用。強(qiáng)的松+低分子肝素在保護(hù)Podocalyxin蛋白方面較GTW、GTW+清熱止血顆粒起效快,但是隨著時間推移三者療效無差異。
【關(guān)鍵詞】：紫癜性腎炎 中成藥 Nephrin Podocin Podocalyxin
【學(xué)位授予單位】：河南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R272;R-332
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-13
• 材料和方法13-24
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 2 實(shí)驗(yàn)方法14-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-33
• 1 Western Blot法檢測各組含藥血清對足細(xì)胞損傷模型Nephrin蛋白表達(dá)量的影響24-26
• 2 Western Blot法檢測各組含藥血清對足細(xì)胞損傷模型Podocin蛋白表達(dá)量的影響26-28
• 3 Western Blot法檢測各組含藥血清對足細(xì)胞損傷模型Podocalyxin蛋白表達(dá)量的影響28-30
• 4 免疫熒光法測定各組含藥血清對足細(xì)胞損傷模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin蛋白定位表達(dá)的影響30-33
• 討論33-38
• 一 中藥對HSPN的研究33-36
• 二 HSPN模型探討36-38
• 結(jié)論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 附錄43-51
• 附錄1 綜述及文獻(xiàn)43-51
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 附錄2 科研情況及科研論文51

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杜學(xué)峰;;簡單美味的水果藥膳[J];養(yǎng)生大世界;2010年11期

2 張行;;清熱止血治療支擴(kuò)咯血31例療效觀察[J];黑龍江中醫(yī)藥;1989年01期

3 趙莉;盧燕;馬寶璋;;清熱止血寧對未成年大鼠性腺軸調(diào)節(jié)功能的影響[J];上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2008年03期

4 王艷春;;清熱止血法治療崩漏45例臨床觀察[J];遼寧中醫(yī)雜志;1983年11期

5 李慧;劉瑞芬;;祛瘀清熱止血調(diào)經(jīng)法治療宮內(nèi)節(jié)育器出血副反應(yīng)[J];山西中醫(yī);2013年02期

6 楊永芳;50例急、慢性腎炎用清熱止血法治療[J];上海中醫(yī)藥雜志;1993年11期

7 邢磊;鐘慈聲;;清熱止血藥治療乳糜尿前后足背皮膚電鏡觀察及其發(fā)病與治療機(jī)理探討[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;1992年12期

8 邢聰，邢濤，邢雪梅，邢磊;清熱止血藥治療乳糜尿淋巴管內(nèi)壓力觀察[J];中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志;1996年04期

9 邢聰，邢雪梅，，邢磊;清熱止血藥對乳糜尿患者免疫功能的觀察[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;1994年10期

10 包書偉;止血益精湯[J];廣西中醫(yī)藥;1997年05期

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院博士 孟華;清熱止血藥膳三款[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙莉;清熱止血寧治療血熱型崩漏、月經(jīng)過多的實(shí)驗(yàn)研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 尚東方;清熱止血顆粒、雷公藤多苷對紫癜性腎炎足細(xì)胞損傷模型Nephrin、Podocin和Podocalyxin分子蛋白表達(dá)的影響[D];河南中醫(yī)藥大學(xué);2016年

本文編號：574094