本文關(guān)鍵詞：Vero細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基的篩選及其培養(yǎng)流感病毒H5N1條件的優(yōu)化

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【摘要】：目的篩選適宜Vero細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,并優(yōu)化其培養(yǎng)流感病毒H5N1的條件。方法取VP-SFM培養(yǎng)的Vero細(xì)胞(SFM-Vero),以增殖速率為指標(biāo),篩選無(wú)血清培養(yǎng)基[VP-SFM、EX-CELL~(TM) VERO、Virus Pro ~(TM) VERO、自制無(wú)血清培養(yǎng)基1(SFM-1)和2(SFM-2)];采用中心組合實(shí)驗(yàn)(Box-Behnken)優(yōu)化SFM-Vero培養(yǎng)流感病毒H5N1的pH、TPCK-Trypsin濃度和病毒接種MOI。結(jié)果 Vero細(xì)胞在VP-SFM和自制SFM-1培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況好于其他無(wú)血清培養(yǎng)基;H5N1病毒株能夠感染無(wú)血清適應(yīng)的Vero細(xì)胞;SFM-Vero培養(yǎng)流感病毒H5N1較優(yōu)條件為:p H 7.64,TPCK-Trypsin濃度0.68μg/ml,MOI 0.01。在該條件下培養(yǎng)的流感病毒HA滴度可達(dá)768 HAU/50μl,為正常培養(yǎng)基培養(yǎng)的Vero細(xì)胞的2.33倍。結(jié)論篩選出適宜Vero細(xì)胞生長(zhǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基,優(yōu)化了流感病毒H5N1 Vero細(xì)胞適應(yīng)株無(wú)血清培養(yǎng)的條件。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所;南開(kāi)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 無(wú)血清培養(yǎng)基 流感病毒Vero細(xì)胞適應(yīng)株 HN
【基金】：細(xì)胞流感減毒活疫苗合作研究(國(guó)際科技合作項(xiàng)目,2011DFR30420) 腮腺炎減毒活疫苗等病毒性疫苗關(guān)鍵技術(shù)及產(chǎn)品研發(fā)(2012AA02A404) Vero細(xì)胞流感減毒活疫苗研制(2013ZX10004003003002) 疫苗研發(fā)與新技術(shù)應(yīng)用省創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(2015HC027)
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： 流感病毒為單股負(fù)鏈RNA病毒,變異快[1],是威脅人類健康的主要病原體之一。目前,接種流感疫苗是預(yù)防和控制流感大流行的最直接且行之有效的手段[2-3]。鑒于使用雞胚生產(chǎn)流感疫苗存在較多不足之處[4],因此,WHO推薦使用Vero細(xì)胞作為流感疫苗的生產(chǎn)介質(zhì)[5-6]。Vero細(xì)胞是日本學(xué)者M(jìn)

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：572942