本文關鍵詞：Vero細胞無血清培養(yǎng)基的篩選及其培養(yǎng)流感病毒H5N1條件的優(yōu)化

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【摘要】：目的篩選適宜Vero細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基,并優(yōu)化其培養(yǎng)流感病毒H5N1的條件。方法取VP-SFM培養(yǎng)的Vero細胞(SFM-Vero),以增殖速率為指標,篩選無血清培養(yǎng)基[VP-SFM、EX-CELL~(TM) VERO、Virus Pro ~(TM) VERO、自制無血清培養(yǎng)基1(SFM-1)和2(SFM-2)];采用中心組合實驗(Box-Behnken)優(yōu)化SFM-Vero培養(yǎng)流感病毒H5N1的pH、TPCK-Trypsin濃度和病毒接種MOI。結果 Vero細胞在VP-SFM和自制SFM-1培養(yǎng)基中生長情況好于其他無血清培養(yǎng)基;H5N1病毒株能夠感染無血清適應的Vero細胞;SFM-Vero培養(yǎng)流感病毒H5N1較優(yōu)條件為:p H 7.64,TPCK-Trypsin濃度0.68μg/ml,MOI 0.01。在該條件下培養(yǎng)的流感病毒HA滴度可達768 HAU/50μl,為正常培養(yǎng)基培養(yǎng)的Vero細胞的2.33倍。結論篩選出適宜Vero細胞生長的無血清培養(yǎng)基,優(yōu)化了流感病毒H5N1 Vero細胞適應株無血清培養(yǎng)的條件。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學生物學研究所;南開大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 無血清培養(yǎng)基 流感病毒Vero細胞適應株 HN
【基金】：細胞流感減毒活疫苗合作研究(國際科技合作項目,2011DFR30420) 腮腺炎減毒活疫苗等病毒性疫苗關鍵技術及產品研發(fā)(2012AA02A404) Vero細胞流感減毒活疫苗研制(2013ZX10004003003002) 疫苗研發(fā)與新技術應用省創(chuàng)新團隊(2015HC027)
【分類號】：R373.13
【正文快照】： 流感病毒為單股負鏈RNA病毒,變異快[1],是威脅人類健康的主要病原體之一。目前,接種流感疫苗是預防和控制流感大流行的最直接且行之有效的手段[2-3]。鑒于使用雞胚生產流感疫苗存在較多不足之處[4],因此,WHO推薦使用Vero細胞作為流感疫苗的生產介質[5-6]。Vero細胞是日本學者M

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本文編號：572942