本文關(guān)鍵詞：新型疫苗佐劑低分子量肝素鈉及帕米膦酸佐劑效應(yīng)研究

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【摘要】：在疫苗的使用中,佐劑具有重要的作用。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,佐劑的研發(fā)也得到了極大地促進(jìn),新型佐劑層出不窮,例如CpG二寡聚核苷酸(CpG oligodeoxynucleotides,CpG ODN)佐劑,免疫刺激復(fù)合物(Immunostimulating complex,ISCOM)佐劑,納米佐劑以及Toll樣受體(Toll-like receptors, TLR)依賴型佐劑相繼出現(xiàn)。盡管佐劑的種類繁多,但目前被批準(zhǔn)用于臨床使用的仍然很少,且認(rèn)證使用的包括鋁佐劑在內(nèi)的佐劑在使用中仍然具有著局限性,例如無(wú)法有效的增強(qiáng)細(xì)胞免疫、引起局部刺激癥狀等不良反應(yīng)。因此,開(kāi)發(fā)安全性高、對(duì)體液免疫和細(xì)胞免疫均有較好增強(qiáng)作用的新型疫苗佐劑具有重要的意義。低分子量肝素鈉(Low molecular weight heparin sodium,LMWH-Na)和帕米膦酸(Pamidronic acid,PAD)是臨床上分別作為抗凝血?jiǎng)┖椭委煿羌膊〉膬煞N藥物,LMWH-Na屬于糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)家族中肝素類物質(zhì),PAD屬于雙膦酸鹽物質(zhì)。近年來(lái),研究人員發(fā)現(xiàn)肝素類物質(zhì)和雙膦酸鹽具有多種生物功能,例如免疫調(diào)節(jié)作用和抗腫瘤作用,尤其是兩者的免疫調(diào)節(jié)作用受到許多研究人員的青睞,并且在機(jī)制研究上也取得了一定的成果。另外,LMWH-Na和PAD結(jié)構(gòu)成分明確,易于生產(chǎn)、保存和運(yùn)輸,且作為臨床藥物具有一定的安全性,因此,具有作為佐劑的潛力。基于肝素類藥物以及雙膦酸鹽的免疫調(diào)節(jié)作用,本實(shí)驗(yàn)旨在初步探討LMWH-Na和PAD作為佐劑對(duì)甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)疫苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響。實(shí)驗(yàn)中將甲型肝炎減毒活疫苗HepA-1(18 EU)與5種不同劑量的LMWH-Na以及4種不同劑量的PAD分別混合作為實(shí)驗(yàn)組,并取生理鹽水作為陰性對(duì)照組、HepA-1(18 EU)作為陽(yáng)性對(duì)照組、HepA-1混合Al (OH) 3 (300μg)作為鋁佐劑對(duì)照組,于0周經(jīng)背部皮下注射,共免疫一次,并在免疫后第4、8、12、16周進(jìn)行尾靜脈采血,采用ELISA法檢測(cè)小鼠血清中抗-HAV抗原特異性IgG抗體水平。在實(shí)驗(yàn)期間,對(duì)小鼠的健康狀況進(jìn)行觀察,并于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),取陰性對(duì)照組以及LMWH-Na和PAD最大劑量組小鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟各主要器官制作病理切片進(jìn)行對(duì)比觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,LMWH-Na具有一定的佐劑效應(yīng),其佐劑效應(yīng)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,至第8周達(dá)到高峰,LMWH-Na的佐劑效應(yīng)并不是隨著注射劑量的升高而增加,而是在10 μL/只時(shí)具有最佳效果,但其佐劑效應(yīng)不如鋁佐劑。PAD的佐劑效果不佳,PAD各劑量組實(shí)驗(yàn)小鼠的抗-HAV IgG水平在所測(cè)各時(shí)間點(diǎn)較陽(yáng)性對(duì)照組沒(méi)有大幅度增高,表明實(shí)驗(yàn)組小鼠使用PAD作為免疫佐劑后體液免疫效應(yīng)未有顯著增強(qiáng)。分析認(rèn)為,雖然實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PAD的佐劑效應(yīng)不佳,但這并不意味著其不具有佐劑效應(yīng),而可能是由于實(shí)驗(yàn)小鼠的鼠齡較小,體內(nèi)免疫系統(tǒng)的發(fā)育并沒(méi)有完全成熟造成的,也可能是由于所選擇的PAD劑量不合適,從而不能完全發(fā)揮增強(qiáng)體液免疫的作用。下一步實(shí)驗(yàn)將從這兩方面入手,探討PAD作為佐劑的可能性。在佐劑的安全性試驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)期間小鼠未出現(xiàn)蜷縮、豎毛、搔鼻、抽搐等明顯異常,陰性對(duì)照組和LMWH-Na實(shí)驗(yàn)組小鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟組織病理分析均未觀察到明顯病變。陰性對(duì)照組和PAD實(shí)驗(yàn)組小鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟組織病理分析均未觀察到明顯病變,表明LMWH-Na和PAD安全性良好。
【關(guān)鍵詞】：低分子量肝素鈉 帕米膦酸 佐劑 甲肝疫苗 體液免疫
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R392
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-19
• 一、疫苗佐劑概況8-9
• 二、研究新型疫苗的必要性9-10
• 三、低分子量肝素鈉10-14
• (一) 低分子量肝素鈉的特征10-11
• (二) 肝素的抗病毒作用11-12
• (三) 肝素具有抗癌作用12
• (四) 肝素調(diào)節(jié)免疫的作用12-14
• 四、帕米膦酸14-19
• (一) 雙膦酸鹽家族以及帕米膦酸14-15
• (二) 雙膦酸鹽增強(qiáng)免疫的作用15-16
• (三) 雙膦酸鹽的抗腫瘤作用16-19
• 第一部分 低分子量肝素鈉佐劑對(duì)甲型肝炎病毒疫苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響19-30
• 一、材料與方法19-24
• (一) 材料19-20
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法20-24
• 二、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理以及分析24-28
• (一) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理24-25
• (二) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析25-26
• (三) 病理學(xué)分析26-28
• 三、討論28-29
• 四、小結(jié)29-30
• 第二部分 帕米膦酸作為佐劑對(duì)甲型肝炎病毒疫苗誘導(dǎo)小鼠體液免疫應(yīng)答的影響30-41
• 一、材料和方法30-35
• (一) 材料30-31
• (二) 實(shí)驗(yàn)方法31-35
• 二、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理以及分析35-39
• (一) 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理35-36
• (二) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析36-37
• (三) 病理學(xué)分析37-39
• 三、討論39-40
• 四、小結(jié)40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 附錄45-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷48-49

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1 本刊編輯部;低分子量肝素[J];中國(guó)介入心臟病學(xué)雜志;2000年01期

2 王愛(ài)平,李冬梅;低分子量肝素治療短暫性腦缺血發(fā)作的臨床探討[J];中國(guó)慢性病預(yù)防與控制;2002年02期

3 楊樸,張文召,張欽昌;低分子量肝素治療重癥短暫性腦缺血發(fā)作46例[J];山東醫(yī)藥;2003年17期

4 高祥勝;低分子量肝素鈉治療慢性肺源性心臟病50例[J];臨床肺科雜志;2004年06期

5 熊長(zhǎng)明;何建國(guó);柳志紅;程顯聲;;低分子量肝素致血小板減少一例[J];中國(guó)循環(huán)雜志;2005年06期

6 林俊華;周志堂;李麗純;;納絡(luò)酮與低分子量肝素聯(lián)合治療肺心病急性加重期的療效觀察[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2006年05期

7 凌政,吳偉波;低分子量肝素的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];華夏醫(yī)學(xué);2000年06期

8 張淇釧,陳紀(jì)平;低分子量肝素的臨床應(yīng)用[J];河北醫(yī)藥;2000年04期

9 陳錦海,黃榮桂;低分子量肝素治療原發(fā)性腎病綜合征療效觀察[J];福建醫(yī)藥雜志;2001年03期

10 孫玲,劉振川,張瑞軍,張繼振;低分子量肝素鈉治療糖尿病合并腦梗死66例觀察[J];中國(guó)鄉(xiāng)村醫(yī)藥;2001年06期

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1 林惠芬;華偉光;李慧良;;小鼠耳廓微循環(huán)活體觀察低分子量肝素對(duì)微循環(huán)的影響[A];2004年中國(guó)化妝品學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

2 嚴(yán)翔;徐樸;吳秋;段峰;周佑德;李艷;;低分子量肝素對(duì)腦梗死患者血液流變學(xué)的影響[A];第四屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 邱氟;呂新生;李宜雄;李介秋;范欽橋;周日光;;低分子量肝素預(yù)防重癥急性胰腺炎并發(fā)胰性腦病的前瞻性臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第10屆全國(guó)胰腺外科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

4 李學(xué)軍;潘燕;雷天落;李宇華;;洛伐他丁和低分子量肝素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用以及腫瘤轉(zhuǎn)移的影響[A];第六屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會(huì)論文摘要集[C];2007年

5 胡文勝;;血塞通聯(lián)合低分子量肝素治療急性腦梗死的臨床研究[A];山東省第三次中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)內(nèi)科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2011年

6 況瑩;陳銀;葉逢春;羅明芳;邢新會(huì);;重組肝素酶Ⅰ制備肝素寡糖及其熱穩(wěn)定性的研究[A];中國(guó)資源生物技術(shù)與糖工程學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2005年

7 周正彪;邱平;段力平;王慶秋;;低分子量肝素抗凝在腎功能衰竭伴出血傾向患者血透中的應(yīng)用[A];2001年全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2001年

8 殷薇;肖平;段紹斌;劉伏友;;低分子量肝素和地塞米松對(duì)人白蛋白致HK-2細(xì)胞增殖及FN、TGF-β_1分泌的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腎臟病學(xué)分會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

9 朱明霞;;纖維蛋白原功能測(cè)定對(duì)肺心病臨床診療意義的研究[A];第十一屆全國(guó)血栓與止血學(xué)術(shù)會(huì)議暨血栓栓塞性疾�。ㄑㄅc止血）基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文摘要匯編及學(xué)習(xí)班講義[C];2007年

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1 莫云名;心血管疾病應(yīng)用低分子量肝素探討[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2004年

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1 張志國(guó);超低分子量肝素抗腦缺血再灌注損傷作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2008年

2 傅立;生物工程肝素與低分子量肝素的酶法制備、結(jié)構(gòu)鑒定與構(gòu)效關(guān)系研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2014年

3 于昕;蛋白激酶在妊高征大鼠腎臟的表達(dá)及低分子量肝素干預(yù)治療的影響機(jī)制[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王瑋;新型疫苗佐劑低分子量肝素鈉及帕米膦酸佐劑效應(yīng)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

2 齊文靜;高活性低分子量肝素的制備及活性研究[D];武漢理工大學(xué);2010年

3 陳洲;肝素生產(chǎn)后處理工藝的改進(jìn)及低分子量肝素生產(chǎn)工藝的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

4 吳艷芳;低分子量肝素精細(xì)結(jié)構(gòu)的分析研究[D];東華大學(xué);2012年

5 王強(qiáng);低分子量肝素改善急性胰腺炎微循環(huán)障礙的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2011年

6 于北凱;低分子量肝素對(duì)肝癌細(xì)胞株增殖、黏附相關(guān)特性的影響及機(jī)制研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2014年

7 任昊;肝素和低分子量肝素對(duì)人單核細(xì)胞表面AGE受體的影響[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 林曉倩;超低分子量肝素對(duì)神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的作用及其機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

9 田時(shí)靜;低分子量肝素治療重癥急性胰腺炎研究進(jìn)展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

10 劉斌焰;低分子量肝素和紫草聯(lián)合應(yīng)用對(duì)SAP大鼠干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

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