發(fā)布時間：2017-07-16 11:05

  本文關(guān)鍵詞：一株鼠抗人PD-1單克隆抗體的制備及其生物學(xué)特性鑒定

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【摘要】：目的:制備鼠抗人PD-1單克隆抗體并對其生物學(xué)特性進(jìn)行鑒定。方法:以穩(wěn)定表達(dá)人PD-1分子的基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株L929/PD-1免疫BALB/c小鼠,采用流式細(xì)胞術(shù)篩選分泌鼠抗人PD-1單抗的雜交瘤細(xì)胞株。用Ig G亞型快速定性試紙法、腫瘤細(xì)胞株表面PD-1分子識別譜檢測、抗體效價測定、競爭結(jié)合抑制實驗和蛋白質(zhì)印跡等方法對所獲PD-1單抗的生物學(xué)特性進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果:獲得1株持續(xù)穩(wěn)定分泌PD-1單抗的雜交瘤細(xì)胞株,命名為6E1。單抗6E1的重鏈為Ig G1、輕鏈為κ。單抗6E1對腫瘤細(xì)胞株U937、Thp-1、Jurkat細(xì)胞表面PD-1分子的識別譜與商品化PD-1單抗MIH4一致。單抗6E1與商品化抗體MIH4具有相似的識別位點。蛋白質(zhì)印跡檢測結(jié)果表明單抗6E1可特異性識別PD-1分子。結(jié)論:成功獲得了1株鼠抗人PD-1單克隆抗體。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部免疫學(xué)系;蘇州市立醫(yī)院北區(qū)消化研究中心;
【關(guān)鍵詞】： PD- PD-L 單克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31370887,81373149,31200661) 蘇州市科技發(fā)展計劃項目(SYS201363)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 共刺激分子PD-1(CD279)屬于B7家族成員。人PD-1基因位于2號染色體,其c DNA全長為2 106個核苷酸,編碼相對分子質(zhì)量為(50~55)×103的Ⅰ型跨膜糖蛋白[1]。PD-1分子誘導(dǎo)性表達(dá)于活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞[2]�，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn),PD-1有PD-L1和PD-L2兩個配

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本文編號：548335