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TALEN構(gòu)建Fndc5基因敲除小鼠及初步分析

發(fā)布時(shí)間:2017-07-14 02:04

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【摘要】:目的通過構(gòu)建Fndc5基因敲除小鼠,為后續(xù)的研究提供動(dòng)物模型。方法運(yùn)用TALEN技術(shù)在Fndc5基因FNIII domain中造成缺失突變,并通過測(cè)序進(jìn)行基因型鑒定。通過配對(duì)建立穩(wěn)定遺傳系并在mRNA和DNA水平鑒定出生小鼠基因型;對(duì)不同年齡段出生小鼠進(jìn)行體重、血糖分析;通過q PCR確定Fndc5在腎臟、肝臟、大腦、肌肉、心臟等組織中的表達(dá)情況。結(jié)果成功構(gòu)建并鑒定得到4種不同的Fndc5基因敲除小鼠品系;不同年齡段出生小鼠體重、血糖未見顯著性差異;確定Fndc5在肌肉、心臟等組織中高表達(dá)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)在國際上成功構(gòu)建了Fndc5基因敲除小鼠,并進(jìn)行了初步分析,為深入研究Fndc5基因在體內(nèi)中的功能提供了動(dòng)物模型。
【作者單位】: 寧波大學(xué)海洋學(xué)院;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所藥理毒理中心中藥(天然藥物)創(chuàng)新藥物研發(fā)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院-普渡大學(xué)脂肪代謝聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室;北京唯尚立德生物科技有限公司;普渡大學(xué)動(dòng)物系;
【關(guān)鍵詞】骨骼肌 Fndc基因 纖維連接蛋白 TALEN
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81471070) “重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(2012ZX09101,2012ZX09301002-001) 諾華諾德-協(xié)和英才基金(肌信息素抵抗肥胖作用機(jī)理的研究) 藥植所創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃資助
【分類號(hào)】:R-332
【正文快照】: 。創(chuàng)新藥物研發(fā)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院-普渡大學(xué)脂肪代謝聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室,北京100193;3.北京唯尚立德生物科技有限公司,北京100085;4.普渡大學(xué)動(dòng)物系,美國)骨骼肌在調(diào)控系統(tǒng)能量穩(wěn)態(tài)上扮演著重要的角色。而且骨骼作為一個(gè)分泌器官漸漸被認(rèn)同,肌肉分泌和表達(dá)的細(xì)胞因子和

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