本文關(guān)鍵詞：人源化抗血管內(nèi)皮生長因子單克隆抗體質(zhì)控方法的建立

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【摘要】：目的建立人源化抗血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)單克隆抗體的質(zhì)控方法。方法采用還原/非還原型毛細(xì)管凝膠電泳(CE-SDS)測定人源化抗VEGF單抗的純度;在0.5和25.0 mg·m L~(-1)濃度條件下,采用分子排阻高效液相色譜(SE-HPLC)測定制品中單體和聚合物含量;毛細(xì)管等電聚焦電泳(c IEF)測定其等電點(diǎn);陽離子交換高效色譜(CEXHPLC)測定電荷異構(gòu)體含量;反相高效色譜(RP-HPLC)和LC-MS檢測Lys-C酶切后制品肽圖;人血管內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,Hu VEC)增殖抑制試驗(yàn)測定其生物學(xué)活性;其余項(xiàng)目按照2015年版《中國藥典》要求進(jìn)行。結(jié)果人源化抗VEGF單抗原液和成品的還原型CE-SDS的純度分別(97.77±0.25)%和(97.43±0.57)%,非還原型CE-SDS純度分別為(98.97±0.15)%和(98.73±0.06)%;0.5 mg·m L~(-1)濃度下,原液和成品的單體含量分別為(98.07±0.55)%和(98.20±0.52)%;25.0 mg·m L~(-1)濃度下,原液和成品的聚合物含量分別為(2.00±0.53)%和(1.93±0.55)%;CEX-HPLC檢測原液和成品的酸性區(qū)含量分別為(18.33±0.64)%和(18.60±0.44)%,主峰含量分別為(69.03±0.80)%和(69.20±0.44)%,堿性區(qū)含量分別為(12.70±1.37)%和(12.20±0.87)%;c IEF和LC-MS測定原液和成品的等電點(diǎn)和肽圖均與參比品一致;HUVEC增殖抑制法測定原液和成品的生物學(xué)活性分別為參比品的(107±6)%和(100±10)%。其他各項(xiàng)指標(biāo)均符合《中國藥典》要求及其他相關(guān)要求。結(jié)論初步建立了人源化抗VEGF單克隆抗體的質(zhì)控方法,可用于該制品的常規(guī)質(zhì)量控制。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 人血管內(nèi)皮生長因子 人源化抗體 質(zhì)量控制
【基金】：國家科技重大專項(xiàng)重大新藥創(chuàng)制資助項(xiàng)目(2014ZX09304311-001)
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】：

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本文編號(hào)：534804