5-氟尿嘧啶多克隆抗體的制備和鑒定
本文關(guān)鍵詞:5-氟尿嘧啶多克隆抗體的制備和鑒定
【摘要】:目的制備5-氟尿嘧啶(5-FU)免疫原并制備其多克隆抗體。方法采用化學(xué)合成法對5-FU進(jìn)行修飾制備5-氟尿嘧啶-1-基乙酸半抗原(5-FUAA),并經(jīng)碳酰二亞胺鹽法將其分別與牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)連接以制備免疫原。采用5-FU與BSA結(jié)合的免疫原(5-FUAA-BSA)免疫BALB/c小鼠制備多克隆抗體,5-FU與OVA結(jié)合物(5-FUAA-OVA)包被酶標(biāo)板經(jīng)間接ELISA檢測抗血清效價(jià),并采用ELISA與Western blot法檢測抗血清的特異性。結(jié)果成功合成半抗原5-FUAA,并分別制備5-FUAA-BSA和5-FUAA-OVA完全抗原。將5-FUAA-BSA免疫BALB/c小鼠制備的免疫血清效價(jià)達(dá)1∶1 280 000,且該多克隆抗體能特異地結(jié)合5-FU半抗原。結(jié)論成功制備了5-FU的多克隆抗體。
【作者單位】: 廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究所臨床免疫學(xué)研究室;
【關(guān)鍵詞】: -FU 完全抗原 多克隆抗體
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30972779) 廣東省教育廳科技創(chuàng)新重點(diǎn)項(xiàng)目(2012KJCX0059)
【分類號】:R392
【正文快照】: 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)自1957年由Heidelberger合成以來,一直是臨床上重要的基礎(chǔ)化療藥物[1-3]。其主要應(yīng)用于實(shí)體瘤的治療[4],作用機(jī)制是干擾DNA和RNA及蛋白質(zhì)的合成,誘導(dǎo)細(xì)胞死亡,抑制腫瘤生長[5-6]。但因其在體內(nèi)的代謝快、生物利用率低等特性[7],故需要高劑量方
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