本文關(guān)鍵詞：一種成年SD大鼠背根節(jié)神經(jīng)元分離與培養(yǎng)新方法的建立

  更多相關(guān)文章： 細(xì)胞培養(yǎng) 背根神經(jīng)節(jié) 膠原酶

【摘要】：目的:建立成年SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的分離和培養(yǎng)的方法,并探索膠原酶的最佳消化時(shí)間。方法:取成年Sprague-Dawley(SD)大鼠的背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal Root Ganglion,DRG),經(jīng)0.5%的膠原酶Ⅰ和0.05%胰酶消化后,接種到多聚賴氨酸包被的細(xì)胞培養(yǎng)板中;4 d后傳代并用差速貼壁法純化神經(jīng)元細(xì)胞;采用神經(jīng)元特異性烯醇化酶(Neuron-specific Enolase,NSE)免疫組化試劑盒進(jìn)行鑒定,并計(jì)算細(xì)胞純度;分別用膠原酶作用1h、24 h和48 h來(lái)探索膠原酶消化的最佳時(shí)間。結(jié)果:培養(yǎng)的DRGs生長(zhǎng)狀態(tài)良好,傳代一次后雜細(xì)胞多數(shù)被去除,神經(jīng)元的純度可達(dá)到(94.28±1.87)%,貼壁的DRG神經(jīng)元可存活2至3周。結(jié)論:成功建立成年SD大鼠DRG神經(jīng)元原代培養(yǎng)體系,該體系可獲得生長(zhǎng)狀態(tài)良好、純度較高的DRG神經(jīng)元細(xì)胞。
【作者單位】： 中國(guó)藥科大學(xué)臨床藥學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 細(xì)胞培養(yǎng) 背根神經(jīng)節(jié) 膠原酶
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30973003,30901993)
【分類號(hào)】：R-33
【正文快照】： 在包括慢性前列腺炎/慢性盆體疼痛綜合癥(Chronicprostatitis/chronic pain syndrome pan,CP/CPPS)等機(jī)體神經(jīng)感知相關(guān)機(jī)制的探討中,需要進(jìn)行大量與脊柱背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)有關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究。DRG又稱脊神經(jīng)節(jié),為脊神經(jīng)發(fā)出區(qū)域的膨大部分,節(jié)內(nèi)包裹著大量呈卵

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