本文關鍵詞：人源抗H7N9血凝素中和抗體IgG的制備及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 :將從全人源Fab噬菌體抗體庫篩選獲得的抗H7N9血凝素Fab抗體基因進行基因工程改造,以表達全分子抗H7N9血凝素中和抗體Ig G,并驗證其對H7N9型禽流感病毒的中和活性。方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素篩選全人源Fab噬菌體抗體庫,構建全分子Ig G抗體重、輕鏈表達載體,共轉染293 Free Style(293F)細胞,表達并純化Ig G抗體。應用ELISA及Western blot實驗檢測抗體免疫學活性,微量中和實驗及雞胚預防保護實驗檢測其中和活性,血凝抑制試驗判斷其結合血凝素亞基。結果:成功篩選出1株全人源抗H7N9血凝素Fab抗體基因并構建Ig G真核表達載體。獲得的全分子Ig G抗體重、輕鏈序列正確,并可特異性結合H7N9血凝素。微量中和實驗證明其對H7N9型禽流感病毒有良好中和活性,中和滴度為15.6μg/m L。雞胚預防保護實驗顯示抗體用量為200μg時可達100%保護率。血凝抑制試驗表明其結合血凝素HA2亞基。結論:制備的重組全人源全分子抗H7N9血凝素Ig G抗體可特異性識別H7N9型禽流感病毒血凝素,對H7N9型禽流病毒有顯著的中和作用,為進一步研發(fā)用于禽流感防治的抗體藥物奠定基礎。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學病理學系衛(wèi)生部抗體技術重點實驗室;南京軍區(qū)軍事醫(yī)學研究所;南京醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院耳鼻喉科;
【關鍵詞】： HN 全分子抗體 血凝素 中和抗體
【基金】：國家自然科學基金(81273325) 江蘇省自然科學基金(BK2012527) 江蘇省社會發(fā)展(BE2011842)
【分類號】：R392
【正文快照】： 2013年3月底中國疾病預防與控制中心正式公布3例新型人感染H7N9型禽流感確診病例[1]。此后該病迅速蔓延,患者以高熱、咳嗽、咳痰等流感樣癥狀起病并迅速進展為重癥肺炎、急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),病死率超過30%[1-2]。禽流感一線藥物包

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  本文關鍵詞：人源抗H7N9血凝素中和抗體IgG的制備及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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